惡性腫瘤中一些癌細(xì)胞會(huì)從原發(fā)性腫瘤上脫落,形成循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTCs)。它們可單獨(dú)移動(dòng)或組成小團(tuán)抵達(dá)其他器官(如骨髓、肝臟、肺和大腦等),形成轉(zhuǎn)移瘤。傳統(tǒng)影像學(xué)診斷方式在發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移瘤形成時(shí)往往已錯(cuò)過最佳治療時(shí)機(jī)??蒲腥藛T用取自CTCs細(xì)胞膜上特異性表達(dá)的EpCAM蛋白制成了抗CTCs細(xì)胞的單克隆抗體,過程如圖所示。利用該單克隆抗體可以及早檢查血液中的CTCs細(xì)胞從而診斷腫瘤是否轉(zhuǎn)移,為患者的治療爭(zhēng)取時(shí)間?;卮鹣铝袉栴}:
(1)上述實(shí)驗(yàn)①必須給小鼠注射
EpCAM蛋白
EpCAM蛋白
抗原,以獲得能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞。生產(chǎn)單克隆抗體一般不宜直接培養(yǎng)已免疫過的B淋巴細(xì)胞,主要原因是 B淋巴細(xì)胞不能無限增殖
B淋巴細(xì)胞不能無限增殖
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(2)細(xì)胞在體外融合時(shí)需要誘導(dǎo),與誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合不同的是,圖中②還可用 滅活的病毒
滅活的病毒
誘導(dǎo)融合,該方法誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用,使細(xì)胞互相凝聚,細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布,細(xì)胞膜打開,細(xì)胞發(fā)生融合
病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用,使細(xì)胞互相凝聚,細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布,細(xì)胞膜打開,細(xì)胞發(fā)生融合
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(3)融合后的細(xì)胞需要使用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,在該培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)的細(xì)胞和不能生長(zhǎng)的細(xì)胞依次是 融合的雜交瘤細(xì)胞、未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞
融合的雜交瘤細(xì)胞、未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞
;圖中③需要對(duì)經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞,其檢測(cè)的過程是 用EpCAM蛋白對(duì)克隆化培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行抗體檢測(cè),選出抗體檢測(cè)呈陽性的雜交瘤細(xì)胞
用EpCAM蛋白對(duì)克隆化培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行抗體檢測(cè),選出抗體檢測(cè)呈陽性的雜交瘤細(xì)胞
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(4)若要獲得大量的單克隆抗體,除了采用上圖中④⑤方法培養(yǎng)外,還可采用的培養(yǎng)方法有 將能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng),從小鼠的腹水中獲取大量的單克隆抗體
將能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng),從小鼠的腹水中獲取大量的單克隆抗體
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