艾滋病是由HIV(RNA病毒)引起的一種致死率極高的惡性傳染病,長期以來科學(xué)家通過不同路徑的研究針對其的治療與干預(yù)藥物。干擾素是一種常規(guī)用于治療病毒感染和癌癥的免疫活性蛋白質(zhì),圖1是構(gòu)建干擾素工程菌的過程示意圖?;卮鹣铝袉栴}:
限制酶 |
HindⅢ |
BanHⅠ |
PstⅠ |
EcoRⅠ |
SmaⅠ |
BgⅡ |
識別序列 |
A↓AGCTT |
G↓GATCC |
C↓TGCAG |
G↓AATTC |
CCC↓GGG |
A↓GATCT |
(1)圖1中,過程①屬于基因工程步驟為
A
A
,根據(jù)圖該過程需要
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
酶。
A.獲取目的基因
B.目的基因與運載體重組
C.重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞
D.篩選成功導(dǎo)入的受體細(xì)胞
(2)根據(jù)圖1與表中信息,過程②不宜單獨選用EcoRⅠ是因為
剪切后產(chǎn)生相同的粘性末端
剪切后產(chǎn)生相同的粘性末端
,單選該酶可能會產(chǎn)生
自身環(huán)化和反向鏈接
自身環(huán)化和反向鏈接
現(xiàn)象,應(yīng)選用最佳的限制酶組合是
B
B
。
A.EcoRⅠBamHⅠ
B.BamHⅠ和BglⅡ
C.PstⅠ和BglⅡ
D.SmaⅠ和BamHⅠ
(3)要檢測重組DNA分子是否導(dǎo)入大腸桿菌,將③過程后的大腸桿菌先接種于含
青霉素
青霉素
的培養(yǎng)基上,然后將在該培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌接種在含
四環(huán)素
四環(huán)素
的培養(yǎng)基上,在前者培養(yǎng)基上能生長而在后者培養(yǎng)基上不能生長的是導(dǎo)入重組 DNA分子的工程菌。
(4)利用圖中工程菌生產(chǎn)的干擾素需進(jìn)一步加工才能體現(xiàn)有效活性,請從生物的結(jié)構(gòu)分析這是因為
大腸桿菌作為原核生物不具備高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng),無法對多肽進(jìn)行加工形成確切的空間結(jié)構(gòu)
大腸桿菌作為原核生物不具備高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng),無法對多肽進(jìn)行加工形成確切的空間結(jié)構(gòu)
。
(5)HIV以T細(xì)胞為主要攻擊目標(biāo),原因是T細(xì)胞膜上存在HIV特異性識別的受體CD4和CCR5(圖2),研究結(jié)果顯示CD4分子是T細(xì)胞正常行使功能所必需的,CCR5不是必需的??茖W(xué)家針對受體CD4和CCR5開展了系列的治療可能性研究。圖2為HIV識別和侵染T細(xì)胞的過程;圖3為構(gòu)建“陷阱細(xì)胞”(乙)應(yīng)對HIV的示意圖。請據(jù)圖設(shè)計一種應(yīng)對HIV的方法和說明其原理:
構(gòu)建CCR5缺乏或變異的T細(xì)胞,使其CD4功能完整,則該T細(xì)胞功能正常,但無法被HIV感染;構(gòu)建表面有CD4與CCR5的成熟紅細(xì)胞,使得HIV進(jìn)入紅細(xì)胞,但無法進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄表達(dá),則使其消亡
構(gòu)建CCR5缺乏或變異的T細(xì)胞,使其CD4功能完整,則該T細(xì)胞功能正常,但無法被HIV感染;構(gòu)建表面有CD4與CCR5的成熟紅細(xì)胞,使得HIV進(jìn)入紅細(xì)胞,但無法進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄表達(dá),則使其消亡
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