被我國列入“中國環(huán)境優(yōu)先污染物黑名單”的小分子化合物“1-D芘丁酸”(PBA)具有很強的致癌性。主要存在于空氣、水和土壤中。研究人員針對PBA制備單克隆抗體對其進行免疫學(xué)檢測。
(1)PBA結(jié)構(gòu)簡單,一般要與特定蛋白BSA偶聯(lián)成大分子人工抗原(PBA-BSA)才能引起免疫反應(yīng)??蒲腥藛T取12只生長狀況相同的健康小鼠均分成甲、乙、丙3組,分別用PBA-BSA、PBA、BSA間隔多次免疫。圖1為ELISA酶聯(lián)免疫吸附法檢測免疫小鼠血清抗體相對濃度的原理示意圖。
①檢測過程中需將PBA作為 抗原抗原固定在固相載體上,依次將 待檢抗體、酶標二抗和底物待檢抗體、酶標二抗和底物加入反應(yīng)體系。實驗過程中“充分洗滌”最主要的目的是 洗去未與PBA充分結(jié)合的待檢抗體以及酶標二抗避免影響實驗結(jié)果洗去未與PBA充分結(jié)合的待檢抗體以及酶標二抗避免影響實驗結(jié)果。
②檢測結(jié)果若為甲組顯色較深,乙組、丙組幾乎不顯色,則說明 PBA只有與BSA偶聯(lián)成PBA—BSA才能起到免疫反應(yīng)PBA只有與BSA偶聯(lián)成PBA—BSA才能起到免疫反應(yīng)。
(2)實驗中常用半抑制濃度(IC50)評價抗體靈敏度:即取同樣濃度的不同來源抗體,分別檢測一半抗體被同一種抗原結(jié)合時所需抗原的最低濃度。圖2為(1)中甲組4只小鼠的血清抗體相對濃度和IC50值。
據(jù)圖分析,制備PBA單克隆抗體時應(yīng)選擇 ⅣⅣ號小鼠用作細胞融合的供體,理由是 其抗體相對濃度較高且IC50值最低即抗體靈敏度高其抗體相對濃度較高且IC50值最低即抗體靈敏度高。
【答案】抗原;待檢抗體、酶標二抗和底物;洗去未與PBA充分結(jié)合的待檢抗體以及酶標二抗避免影響實驗結(jié)果;PBA只有與BSA偶聯(lián)成PBA—BSA才能起到免疫反應(yīng);Ⅳ;其抗體相對濃度較高且IC50值最低即抗體靈敏度高
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:11引用:3難度:0.6
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