組織型纖溶酶原激活劑（tPA）是體內纖溶系統(tǒng)的生理性激動劑，也是一種新型的血栓溶解劑。生長激素（GH）可促進動物細胞增殖和乳腺生長發(fā)育及維持泌乳，在動物遺傳育種領域具有重要的功能。研究人員將GH基因導入轉tPA基因小鼠體內，獲得雙轉基因小鼠，以期提高小鼠乳汁中的tPA表達量?；卮鹣铝袉栴}：
（1）首先構建GH基因的表達載體，如圖所示：

GH基因上游的CMV能被

RNA聚合酶

RNA聚合酶

識別并結合，從而開啟轉錄過程；若GH基因是通過反轉錄得到的，則其與原基因的差異在于編碼區(qū)不包含

內含子

內含子

序列。
（2）對卵細胞供體和受體小鼠進行同期發(fā)情處理，還要給供體小鼠注射

促性腺激素

促性腺激素

，以 促進其超數排卵，然后與轉tPA基因公鼠交配。供體小鼠受精后，處死小鼠，獲取受精卵，將GH基因表達載體用

顯微注射

顯微注射

法導入受精卵中。將轉基因受精卵轉移至受體小鼠體內，待仔鼠出生。
（3）若要測定GH基因是否成功導入小鼠細胞核，取仔鼠的

尾部

尾部

（填“骨髓”“乳腺”或“尾部”）細胞檢測更加方便；若要對GH基因和tPA基因進行PCR擴增，需提取細胞基因組DNA，并設計

4

4

種引物。
（4）雙轉基因小鼠長大后，選取健康個體，使其交配產仔后，收集其

乳汁

乳汁

測定其中的tPA蛋白含量。若要觀察GH基因是否促進了tPA基因的表達，還需測定

只轉tPA基因

只轉tPA基因

小鼠的tPA蛋白含量。