在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中,作物秸稈是一種可再生的資源,科研人員以豬盲腸為微生物來源,從中分離能有效分解纖維素的菌株,為開發(fā)適合喂豬的發(fā)酵秸稈飼料提供菌種資源?;卮鹣铝邢嚓P(guān)問題:
(1)秸稈的主要成分是纖維素,篩選的纖維素分解菌可分泌纖維素酶,一般認(rèn)為該酶至少包括
C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶
C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶
三種組分,篩選時常用剛果紅染色法,若在倒平板之前加入剛果紅染液,在纖維素粉和土豆汁等配制的培養(yǎng)基上分離到的產(chǎn)生透明圈的菌種可能不是纖維素分解菌,分析可能的兩個原因是培養(yǎng)基中含有淀粉,產(chǎn)生淀粉酶的微生物周圍會出現(xiàn)透明圈
培養(yǎng)基中含有淀粉,產(chǎn)生淀粉酶的微生物周圍會出現(xiàn)透明圈
、有些微生物具有降解色素的能力
有些微生物具有降解色素的能力
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(2)樣品的采集:在豬屠宰后立即分離盲腸樣品,并用消毒的棉繩結(jié)扎、快速裝入滅菌的封口塑料袋中,并擠出封口袋中多余的空氣后密封,各種操作的目的是防止雜菌的污染
防止雜菌的污染
,其中對棉繩和塑料袋進(jìn)行的分別為消毒和滅菌處理,兩者的差異是滅菌除了殺死物體內(nèi)外所有的微生物,還殺死芽孢和孢子;消毒只是殺死物體內(nèi)外部分微生物,不包括芽孢和孢子
滅菌除了殺死物體內(nèi)外所有的微生物,還殺死芽孢和孢子;消毒只是殺死物體內(nèi)外部分微生物,不包括芽孢和孢子
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(3)將盲腸食糜加0.9%的無菌鹽水,依次配制成10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-87個梯度的稀釋液,選取10-4、10-5、10-6、10-7、10-85個梯度的稀釋液均勻涂布到平板上進(jìn)行培養(yǎng),不選擇10-2、10-3兩個梯度的稀釋液的原因是這兩個梯度的稀釋液中微生物的數(shù)量多,培養(yǎng)后形成的菌落數(shù)目多且不易區(qū)分
這兩個梯度的稀釋液中微生物的數(shù)量多,培養(yǎng)后形成的菌落數(shù)目多且不易區(qū)分
;將不同稀釋度的菌液分別涂布到平板上的目的是在稀釋度足夠高的菌液中,聚集在一起的微生物被分散成單個細(xì)胞,在培養(yǎng)基表面形成單菌落
在稀釋度足夠高的菌液中,聚集在一起的微生物被分散成單個細(xì)胞,在培養(yǎng)基表面形成單菌落
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(4)將培養(yǎng)平板上生長較好的單菌落轉(zhuǎn)移至纖維素鑒定培養(yǎng)基上倒置培養(yǎng)48 h,量取菌圈直徑d以及透明圈直徑D,選擇透明圈直徑D/菌圈直徑d的值大
透明圈直徑D/菌圈直徑d的值大
的菌種進(jìn)行保存并進(jìn)行復(fù)篩。