肺炎克雷伯氏菌是獲得性肺炎主要的致病菌?？咕幬锏牟缓侠硎褂?，導(dǎo)致肺炎克雷伯氏菌耐藥株增多、耐藥性增強(qiáng)。噬菌體是一類細(xì)菌性病毒，被認(rèn)為是最具前景的抗生素替代品。為研究探索應(yīng)用裂解性噬菌體防治多重耐藥肺炎克雷伯氏菌引起的小鼠肺炎，研究人員進(jìn)行了以下實(shí)驗(yàn)。
（1）噬菌體體外抑菌實(shí)驗(yàn)
材料與用具：LB培養(yǎng)基，肺炎克雷伯氏菌懸液，感染復(fù)數(shù)（MOI）分別為10、1、0.1的噬菌體phage1513，PBS（磷酸鹽平衡生理鹽水），恒溫振蕩培養(yǎng)箱，比色計(jì)。
（要求與說明：感染復(fù)數(shù)指侵染時(shí)噬菌體與細(xì)菌個(gè)數(shù)之比，感染復(fù)數(shù)越高，裂解越快。肺炎克雷伯氏菌數(shù)量每小時(shí)測(cè)一次，可通過測(cè)定波長650nm的光密度值并計(jì)算，具體方法不作要求）
完善實(shí)驗(yàn)思路：
①取4個(gè)反應(yīng)器皿，加入等量LB
液體
液體
（液體/固體）培養(yǎng)基。
②分組如下：
A組：3mL肺炎克雷伯氏菌懸液+3mLPBS
B組：3mL菌液+3mL感染復(fù)數(shù)為10的噬菌體phage1513
C組：3mL菌液+3mL感染復(fù)數(shù)為1的噬菌體phage1513
D組：3mL菌液+3mL感染復(fù)數(shù)為0.1的噬菌體phage1513
③置于恒溫振蕩培養(yǎng)箱37℃、150rpm培養(yǎng)，用比色計(jì)每隔1h測(cè)定650nm處光密度值
用比色計(jì)每隔1h測(cè)定650nm處光密度值
。
④統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)，并在坐標(biāo)圖上畫出預(yù)測(cè)結(jié)果：
（2）噬菌體體內(nèi)治療實(shí)驗(yàn)
采用腹腔注射的方式對(duì)小鼠進(jìn)行麻醉，滴鼻20μL肺炎克雷伯氏菌懸液，建立肺炎小鼠模型。滴鼻菌液后2h,3個(gè)實(shí)驗(yàn)組以滴鼻給藥方式分別給予小鼠20μL感染復(fù)數(shù)為10、1、0.1的噬菌體，對(duì)照組滴鼻給予小鼠20μL的PBS緩沖液。自滴鼻菌液開始，每12h記錄死亡小鼠數(shù)量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖：
據(jù)圖可得到的結(jié)論有：①噬菌體在體內(nèi)可以有效地治療肺炎克雷伯氏菌引起的小鼠肺炎
噬菌體在體內(nèi)可以有效地治療肺炎克雷伯氏菌引起的小鼠肺炎
；②感染復(fù)數(shù)越高，噬菌體對(duì)小鼠肺炎感染的保護(hù)作用越強(qiáng)
感染復(fù)數(shù)越高，噬菌體對(duì)小鼠肺炎感染的保護(hù)作用越強(qiáng)
。
（3）分析與討論
①從變異的角度分析，肺炎克雷伯氏菌出現(xiàn)耐藥性的原因是基因突變
基因突變
。
②噬菌體能夠在血液及其他組織中循環(huán)，但也會(huì)被抗體中和，影響其裂解效果。在急性感染治療早期，抗體中和作用并不能成為治療的障礙，原因是噬菌體活動(dòng)要遠(yuǎn)遠(yuǎn)快于抗體的產(chǎn)生（產(chǎn)生抗體需要一段時(shí)間）
噬菌體活動(dòng)要遠(yuǎn)遠(yuǎn)快于抗體的產(chǎn)生（產(chǎn)生抗體需要一段時(shí)間）
。如果噬菌體中和抗體能夠在整個(gè)噬菌體治療過程中一直出現(xiàn)，可通過重復(fù)給藥噬菌體（加大噬菌體給藥劑量）
重復(fù)給藥噬菌體（加大噬菌體給藥劑量）
達(dá)到治療效果。
