如圖表示某種綠色熒光蛋白基因表達載體的構建過程,綠色熒光蛋白基因有820個堿基對(bp),質粒有5369個堿基對(bp)。請據(jù)圖回答問題:
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(1)上述基因表達載體的構建過程需要的基本工具包括:限制酶、DNA連接酶、運載體限制酶、DNA連接酶、運載體。過程①②用相同的兩種限制酶切割,與單一酶切相比的優(yōu)勢有 可以避免目的基因自身環(huán)化、使目的基因定向插入到運載體中可以避免目的基因自身環(huán)化、使目的基因定向插入到運載體中。
(2)過程②目的基因的擴增可通過PCR技術實現(xiàn),進行PCR時除提供DNA母鏈,4種脫氧核苷酸,還需 Taq酶和人工合成的引物Taq酶和人工合成的引物等基本條件(至少填兩個)。PCR可成指數(shù)形式擴增目的基因,每個循環(huán)一般可分為 變性、退火、延伸變性、退火、延伸。
(3)已知圖中質粒經BamHⅠ、HindⅢ雙酶切后進行電泳,若出現(xiàn)了一條長度為5150bp的DNA條帶,則重組質粒的長度為 59705970的DNA片段條帶。
(4)若想獲得發(fā)綠色熒光的小鼠,可將重組質粒用 顯微注射顯微注射法導入小鼠的 受精卵受精卵(細胞)中。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】限制酶、DNA連接酶、運載體;可以避免目的基因自身環(huán)化、使目的基因定向插入到運載體中;Taq酶和人工合成的引物;變性、退火、延伸;5970;顯微注射;受精卵
【解答】
【點評】
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