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如圖表示某種綠色熒光蛋白基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，綠色熒光蛋白基因有820個堿基對（bp），質(zhì)粒有5369個堿基對（bp）。請據(jù)圖回答問題：
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（1）上述基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程需要的基本工具包括：
限制酶、DNA連接酶、運載體
限制酶、DNA連接酶、運載體
。過程①②用相同的兩種限制酶切割，與單一酶切相比的優(yōu)勢有
可以避免目的基因自身環(huán)化、使目的基因定向插入到運載體中
可以避免目的基因自身環(huán)化、使目的基因定向插入到運載體中
。
（2）過程②目的基因的擴(kuò)增可通過PCR技術(shù)實現(xiàn)，進(jìn)行PCR時除提供DNA母鏈，4種脫氧核苷酸，還需
Taq酶和人工合成的引物
Taq酶和人工合成的引物
等基本條件（至少填兩個）。PCR可成指數(shù)形式擴(kuò)增目的基因，每個循環(huán)一般可分為
變性、退火、延伸
變性、退火、延伸
。
（3）已知圖中質(zhì)粒經(jīng)BamHⅠ、HindⅢ雙酶切后進(jìn)行電泳，若出現(xiàn)了一條長度為5150bp的DNA條帶，則重組質(zhì)粒的長度為
5970
5970
的DNA片段條帶。
（4）若想獲得發(fā)綠色熒光的小鼠，可將重組質(zhì)粒用
顯微注射
顯微注射
法導(dǎo)入小鼠的
受精卵
受精卵
（細(xì)胞）中。

【答案】限制酶、DNA連接酶、運載體；可以避免目的基因自身環(huán)化、使目的基因定向插入到運載體中；Taq酶和人工合成的引物；變性、退火、延伸；5970；顯微注射；受精卵
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/10/1 1:0:2組卷：9引用：2難度：0.6
相似題

  • 1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　　）
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    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

  • 2．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng)，嚴(yán)重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)模化生產(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達(dá)。
    （1）通過上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是
     
    （填寫下列編號）。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a(chǎn)目標(biāo)蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
    ⑤目的基因和運載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
    （2）在PCR過程中，引物的功能是
     
    。
    A．啟動DNA復(fù)制
    B．規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
    C．解旋DNA雙鏈
    D．充當(dāng)復(fù)制模板
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    （3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    （4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    （填DNA或RNA/DNA或RNA）。
    （5）在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    （6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用
     
    和
     
    切開，才能與MCO片段高效連接。
    （7）下列實驗操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
    B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
    C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進(jìn)行PCR檢測
    D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5

  • 3．用限制酶EcoRⅤ單獨切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個堿基對）的長鏈，而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長度的DNA片段，見圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端）。
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    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長度為（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
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