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IKK激酶由IKKα、IKKβ和IKKγ三種亞基組成,該酶參與動(dòng)物體內(nèi)免疫細(xì)胞的分化。臨床上發(fā)現(xiàn)某重癥聯(lián)合免疫缺陷(SCID)患兒IKKB基因編碼區(qū)第1183位堿基T突變?yōu)镃,導(dǎo)致IKKβ上第395位酪氨酸被組氨酸代替。為研究該患兒發(fā)病機(jī)制,研究人員應(yīng)用大引物PCR定點(diǎn)誘變技術(shù)培育出SCID模型小鼠,主要過程如圖1、2。
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(1)在PCR反應(yīng)體系中,需要加入引物和IKKB基因外,還需要加入
Taq酶(耐高溫DNA聚合酶)、4種脫氧核苷酸
Taq酶(耐高溫DNA聚合酶)、4種脫氧核苷酸
等。在圖1獲取突變基因過程中,需要以下3種引物:
引物A:5'-CCCCAACCGGAAAGTGTCA-3'(下劃線字母為突變堿基)
引物B:5'-TAAGCTTCGAACATCCTA-3'(下劃線部分為限制酶HindⅢ識(shí)別序列)
引物C:5'-GTGAGCTCGCTGCCCCAA-3'(下劃線部分為限制酶SacⅠ識(shí)別序列)
則PCR1中使用的引物有
引物A和引物C
引物A和引物C
,PCR2中使用的引物有
引物B
引物B
和圖中大引物的
(填“①”或“②”)鏈。
(2)圖2模型鼠培育過程中雜合模型鼠(F0)的培育涉及了一系列現(xiàn)代生物技術(shù),如表是其中的一些步驟,請(qǐng)根據(jù)題意完成表格內(nèi)容。
過程 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/td> 步驟要點(diǎn)
導(dǎo)入 a.處理突變基因與載體
利用限制酶(SacⅠ、HindⅢ)分別處理突變基因和載體
利用限制酶(SacⅠ、HindⅢ)分別處理突變基因和載體
b.構(gòu)建重組載體 利用DNA連接酶催化突變基因和載體連接
c.導(dǎo)入目的基因
利用顯微注射法將重組載體注入小鼠受精卵
利用顯微注射法將重組載體注入小鼠受精卵
發(fā)育 d.獲取早期胚胎 利用專用培養(yǎng)液培養(yǎng)受精卵,并檢測(cè)其發(fā)育狀況
e.代孕獲得小鼠 利用合適的早期胚胎進(jìn)行胚胎移植
f.鑒定、篩選F0小鼠 利用PCR鑒定基因,篩選出雜合鼠F0
(3)根據(jù)圖2雜交結(jié)果,可以確認(rèn)突變基因已經(jīng)較穩(wěn)定地整合到小鼠細(xì)胞的染色體上,在遺傳時(shí)遵循
基因分離
基因分離
定律。研究人員對(duì)三種基因型小鼠胸腺淋巴細(xì)胞中組成IKK激酶的三種亞基進(jìn)行提純和電泳,結(jié)果如圖3。請(qǐng)依據(jù)此結(jié)果提出SCID患者免疫缺陷產(chǎn)生的機(jī)制:
IKKB基因突變導(dǎo)致IKKβ含量減少,IKK激酶活力降低,T細(xì)胞減少
IKKB基因突變導(dǎo)致IKKβ含量減少,IKK激酶活力降低,T細(xì)胞減少

【答案】Taq酶(耐高溫DNA聚合酶)、4種脫氧核苷酸;引物A和引物C;引物B;②;利用限制酶(SacⅠ、HindⅢ)分別處理突變基因和載體;利用顯微注射法將重組載體注入小鼠受精卵;基因分離;IKKB基因突變導(dǎo)致IKKβ含量減少,IKK激酶活力降低,T細(xì)胞減少
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:16引用:2難度:0.7
相似題
  • 1.如圖為某生物的一種多肽酶的基因內(nèi)部和周圍的DNA組成情況.其中標(biāo)出了轉(zhuǎn)錄的起始部位( ini)和終止部位(ter),翻譯的起始密碼子對(duì)應(yīng)序列(sta)的第一個(gè)堿基的位置,終止密碼子對(duì)應(yīng)序列( sto)的第一個(gè)堿基的位置,以及基因中內(nèi)含子的界限(↓)(距離以kb表示,但未按比例畫出).
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    (1)轉(zhuǎn)錄的起始部位稱為
     
    ,是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,它是RNA聚合酶
     
    的部位.
    (2)基因工程中的目的基因主要是指
     
    的基因.該基因來自
     
    (填“基因組文庫”或“cDNA文庫”).
    (3)翻譯時(shí)與密碼子發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)的是轉(zhuǎn)運(yùn)RNA上的反密碼子,該物質(zhì)的主要功能是
     
    .可用抗原-抗體雜交的方法檢驗(yàn)翻譯的產(chǎn)物,若有
     
    出現(xiàn),則表明目的基因表達(dá)出相應(yīng)的產(chǎn)物.
    (4)基因工程在原則上只能產(chǎn)生
     
    的蛋白質(zhì).蛋白質(zhì)工程是以蛋白質(zhì)分子的
     
    及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ).

    發(fā)布:2024/11/2 8:0:1組卷:21引用:2難度:0.1
  • 2.單子葉植物甲具有極強(qiáng)的耐旱性,其耐旱性與某個(gè)基因有關(guān)。若從該植物中獲得該耐旱基因,并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性較弱的雙子葉植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。請(qǐng)回答下列問題:
    (1)理論上,
     
    文庫含生物的全部基因;而
     
    文庫中含有生物的部分基因。
    (2)若要從植物甲的基因文庫中篩選出耐旱基因,從分子角度看最直接的信息是根據(jù)組成耐旱基因的
     
    排列順序,最間接的信息是根據(jù)耐旱基因翻譯的產(chǎn)物
     
    的特性。
    (3)將耐旱基因?qū)腚p子葉植物乙時(shí),采用最多的方法是
     
    ,再經(jīng)過一系列的過程得到再生植株。要確認(rèn)該耐旱基因是否在再生植株中穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性,除了進(jìn)行分子水平的
     
    外,有時(shí)還需要進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的
     
    。
    (4)假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交,子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比3:1時(shí),則可推測(cè)該耐旱基因整合到了
     
    (填“同源染色體的一條上”或“同源染色體的兩條上”)。

    發(fā)布:2024/11/2 8:0:1組卷:1引用:1難度:0.7
  • 3.從基因文庫中獲取目的基因可以根據(jù)下列哪些信息( ?。?br />①基因的核苷酸序列;     ②基因的功能;         ③基因在染色體上的位置;
    ④基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA;   ⑤基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì).

    發(fā)布:2024/11/2 8:0:1組卷:2引用:1難度:0.9
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