抗蟲棉可有效減少棉鈴蟲對幼鈴的危害，而使棉花生殖生長相對增強，轉(zhuǎn)基因單價抗蟲棉是將蘇云金芽孢桿菌中專門破壞棉鈴蟲消化道的Bt殺蟲蛋白基因經(jīng)過改造后利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入棉花細(xì)胞中研制而成，請回答下列有關(guān)問題：
（1）獲取Bt蛋白基因的方法有很多，例如：根據(jù)Bt蛋白的

氨基酸

氨基酸

序列，推導(dǎo)出其基因序列，再利用化學(xué)方法合成目的基因；用已獲得的純度高的Bt蛋白作為抗原，通過

單克隆抗體制備/雜交瘤

單克隆抗體制備/雜交瘤

技術(shù)獲得特異性探針，并將蘇云金芽孢桿菌

基因文庫

基因文庫

中所有基因進行表達(dá)，然后利用該探針，找出與之對應(yīng)的目的基因。用PCR擴增目的基因時，為了能與酶切后的質(zhì)粒進行連接，需要在擴增前設(shè)計的引物上添加

限制（性核酸內(nèi)切）酶識別序列

限制（性核酸內(nèi)切）酶識別序列

，然后利用工具酶可獲取重組質(zhì)粒（基因表達(dá)載體）。
（2）培育該轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的核心環(huán)節(jié)是

構(gòu)建重組DNA（質(zhì)粒）分子

構(gòu)建重組DNA（質(zhì)粒）分子

，重組質(zhì)粒進入受體細(xì)胞與質(zhì)粒上的

T-DNA

T-DNA

基因有關(guān)。
（3）通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入棉花的愈傷組織細(xì)胞后，主要有兩條再生植株的途徑：一是由愈傷組織先分化產(chǎn)生芽和根后再形成一個完整植株的

器官發(fā)生

器官發(fā)生

途徑，二是由愈傷組織產(chǎn)生

胚狀體

胚狀體

后再萌發(fā)形成完整植株的發(fā)生途徑。