研究人員在培育轉(zhuǎn)bt基因抗蟲番茄過程中,選用hpt(抗潮霉素基因)為標(biāo)記基因.為了提高轉(zhuǎn)基因番茄的安全性,在篩選成功后,用Cre酶(能特異識別loxp位點(diǎn),切除loxp位點(diǎn)間的基因序列)切除hpt,相關(guān)技術(shù)流程如圖。
(1)步驟①中,為防止原番茄植株帶有病毒,應(yīng)選用 分生組織(或莖尖或根尖或芽尖)分生組織(或莖尖或根尖或芽尖)作為外植體;培養(yǎng)時,常在培養(yǎng)基中加入2,4-D,其作用是 誘導(dǎo)形成愈傷組織(或誘導(dǎo)脫分化)誘導(dǎo)形成愈傷組織(或誘導(dǎo)脫分化)。
(2)步驟②將bt基因?qū)胗鷤M織的最常用方法是 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。
(3)步驟③需在培養(yǎng)基中加入 潮霉素潮霉素以初步篩選出轉(zhuǎn)入bt基因的植株。
(4)提取F1植株的基因組DNA,用hpt特異性引物進(jìn)行PCR。其中,植株1和2的PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果如圖,據(jù)此判斷,植株 22為不具有hpt的抗蟲番茄。
【考點(diǎn)】植物的組織培養(yǎng).
【答案】分生組織(或莖尖或根尖或芽尖);誘導(dǎo)形成愈傷組織(或誘導(dǎo)脫分化);農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;潮霉素;2
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:47引用:4難度:0.5
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