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Cre-loxP系統(tǒng)能夠?qū)崿F(xiàn)特定基因的敲除，其技術過程如圖1所示?？茖W家把幾種熒光蛋白基因和Cre酶能識別并切割的序列（loxP1和loxP2）串在一起，構(gòu)建如圖2所示的表達載體T，在Cre酶的幫助下，一部分熒光蛋白基因會被隨機地“剪掉”，而剩下的部分得以表達，這樣就可以隨機呈現(xiàn)不同的顏色。這種利用熒光蛋白“點亮”神經(jīng)元的大腦成像技術被稱為“腦彩虹”，能幫助科學家了解大腦。
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（1）構(gòu)建表達載體T需要用到
限制酶和DNA連接
限制酶和DNA連接
酶，常用
顯微注射
顯微注射
法將表達載體T導入小鼠的
受精卵
受精卵
中，獲得細胞中含一個表達載體T的轉(zhuǎn)基因小鼠a（不含Cre酶）。小鼠a的腦組織細胞和其他組織細胞的色彩分別是
紅色
紅色
和
無色
無色
。
（2）已知兩個loxrP1之間或兩個loxP2之間的基因，最多會被Cre酶敲除一次。研究者將Cre酶基因與病毒基因重組構(gòu)建Cre病毒，然后將Cre病毒注入小鼠A體內(nèi)，出現(xiàn)“腦彩虹”現(xiàn)象，小鼠A的一個腦細胞的色彩為
紅色或黃色或藍色
紅色或黃色或藍色
。
（3）利用上述技術可以培育能夠在一個細胞內(nèi)隨機出現(xiàn)兩種顏色的“腦彩虹”小鼠，請依據(jù)題目信息，簡要寫出設計思路
設法使小鼠腦組織細胞內(nèi)有2個相同表達載體T，Cre酶對每個DNA片段隨機剪切，因而細胞的顏色由細胞內(nèi)兩種熒光蛋白的顏色疊加而成
設法使小鼠腦組織細胞內(nèi)有2個相同表達載體T，Cre酶對每個DNA片段隨機剪切，因而細胞的顏色由細胞內(nèi)兩種熒光蛋白的顏色疊加而成
。

【答案】限制酶和DNA連接；顯微注射；受精卵；紅色；無色；紅色或黃色或藍色；設法使小鼠腦組織細胞內(nèi)有2個相同表達載體T，Cre酶對每個DNA片段隨機剪切，因而細胞的顏色由細胞內(nèi)兩種熒光蛋白的顏色疊加而成
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：103引用：6難度：0.6
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  • 1．某科研小組從土壤菌株A、B中分離到同源性為93%的Bt1抗蟲基因和Bt2抗蟲基因的編碼序列，并運用交錯延伸PCR技術獲得了抗蟲性能強的重組B基因，轉(zhuǎn)入煙草獲得成功，過程如圖所示。下列選項正確的是（　?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)
    注：①交錯延伸PCR：基因Bt1和Bt2均作為模板，所需引物相同，圖中僅示其中一條鏈的延伸情況。②啟動子Pr1a可在煙草葉肉細胞中特異性啟動基因的轉(zhuǎn)錄。③圖中生長素合成酶基因是通過成熟mRNA逆轉(zhuǎn)錄獲得的DNA片段，可使植物細胞合成生長素。

    發(fā)布：2024/11/16 21:0:1組卷：36引用：2難度：0.5

  • 2．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

  • 3．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應，嚴重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)?；a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
    （1）通過上述基因工程技術獲取目標產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是
     
    （填寫下列編號）。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a(chǎn)目標蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構(gòu)建表達載體
    （2）在PCR過程中，引物的功能是
     
    。
    A．啟動DNA復制
    B．規(guī)定擴增區(qū)間
    C．解旋DNA雙鏈
    D．充當復制模板
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    （3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設計的PCR引物應為圖甲中的
     
    。
    （4）獲取目的基因后，需要和載體重組導入受體細胞。載體的化學本質(zhì)是
     
    （填DNA或RNA/DNA或RNA）。
    （5）在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    （6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用
     
    和
     
    切開，才能與MCO片段高效連接。
    （7）下列實驗操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
    B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進行鑒別
    C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進行PCR檢測
    D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5
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