蘋果樹腐爛病由真菌感染引起，為了開發(fā)生物防治該病的途徑，研究者擬從土壤中分離篩選出能抑制蘋果樹腐爛病菌生長(zhǎng)的芽孢桿菌，實(shí)驗(yàn)流程如圖。

（1）配制培養(yǎng)基時(shí)，培養(yǎng)基的滅菌應(yīng)該在調(diào)pH

之后

之后

（填“之前”或“之后”），培養(yǎng)基滅菌的常用方法是

高壓蒸汽滅菌法

高壓蒸汽滅菌法

，為避免混淆應(yīng)在培養(yǎng)皿的

皿底

皿底

做標(biāo)記，并將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)。
（2）圖中①過程取5g土壤加入

45

45

mL無菌水中充分震蕩得到10^-1的土壤懸液。進(jìn)行系列稀釋后用

稀釋涂布平板

稀釋涂布平板

法進(jìn)行接種，每個(gè)濃度重復(fù)3次。37℃條件下，在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)，根據(jù)菌落特征鑒別出芽孢桿菌并進(jìn)一步純化。
（3）目的菌篩選時(shí)，應(yīng)取直徑為5mm的蘋果腐爛病菌菌落移置于

A

A

（填“A”或“B”）處，將芽孢桿菌接種

B

B

（填“A”或“B”）處。培養(yǎng)3～5天，篩選出抑菌率最高的菌株。
（4）探究不同稀釋倍數(shù)的芽孢桿菌發(fā)酵原液對(duì)感染了蘋果樹腐爛病菌枝條的抑菌率的影響，進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：
①發(fā)酵原液稀釋0、5、20、50、100倍，選取健康果樹枝條進(jìn)行消毒和打孔。
②實(shí)驗(yàn)組枝條上分別涂抹等量的

不同稀釋倍數(shù)芽孢桿菌發(fā)酵液

不同稀釋倍數(shù)芽孢桿菌發(fā)酵液

，對(duì)照組枝條上涂抹等量的

無菌水

無菌水

。
③在所有枝條的打孔處接種等量的蘋果腐爛病菌，7天后測(cè)量并計(jì)算抑菌率。
（5）實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明發(fā)酵原液的稀釋倍數(shù)與抑菌率之間呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)的關(guān)系。與化學(xué)防治相比，該方法的優(yōu)勢(shì)是

降低環(huán)境污染；減少化學(xué)試劑的殘留；對(duì)其他動(dòng)物擾動(dòng)小

降低環(huán)境污染；減少化學(xué)試劑的殘留；對(duì)其他動(dòng)物擾動(dòng)小

。