某生物興趣小組想對土壤中能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行分離,并統(tǒng)計每克土壤樣品中的活菌數(shù)目,確定了培養(yǎng)基配方(如表)。將配方中各種物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容到1000mL,再經(jīng)高溫滅菌,制成固體培養(yǎng)基以備用。
KH2PO4 |
NaHPO4 |
MgSO4?7H2O |
蛋白胨 |
葡萄糖 |
尿素 |
瓊脂 |
11.4g |
2.1g |
0.2g |
1.0g |
10.0g |
1.0g |
15.0g |
(1)為保持干燥,培養(yǎng)皿用
干熱滅菌
干熱滅菌
法滅菌;待培養(yǎng)基冷卻到
50
50
℃(填“20”“30”“50”或“80”)左右時,在酒精燈附近倒平板;待平板冷卻凝固后,將平板倒過來放置,可以防止
培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基
培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基
,防止造成污染。
(2)根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷,該同學(xué)不能分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌,原因是
培養(yǎng)基含蛋白胨,尿素不是唯一氮源,(培養(yǎng)基含蛋白胨,蛋白胨中含有氮元素)
培養(yǎng)基含蛋白胨,尿素不是唯一氮源,(培養(yǎng)基含蛋白胨,蛋白胨中含有氮元素)
。
(3)該同學(xué)采用稀釋涂布平板法檢測樣液中細(xì)菌含量。在涂布接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間,這樣做的目的是
檢測培養(yǎng)基平板滅菌(或制備)是否合格
檢測培養(yǎng)基平板滅菌(或制備)是否合格
;然后,將1mL樣液稀釋100倍,在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37,據(jù)此可得出每升樣液中的活菌數(shù)為
3.8×107
3.8×107
。
(4)該同學(xué)還做了不同稀釋倍數(shù)的實驗,且實驗操作都正確規(guī)范,但通過菌落計數(shù)計算后發(fā)現(xiàn),稀釋倍數(shù)低的組計算結(jié)果往往比稀釋倍數(shù)高的組計算結(jié)果略低,可能的原因是
稀釋倍數(shù)低的組菌液濃度更大,更易出現(xiàn)兩個或多個細(xì)胞連在一起形成一個菌落,導(dǎo)致菌落計數(shù)偏低
稀釋倍數(shù)低的組菌液濃度更大,更易出現(xiàn)兩個或多個細(xì)胞連在一起形成一個菌落,導(dǎo)致菌落計數(shù)偏低
。