水蛭素是一種小分子蛋白質,其對凝血酶有極強的抑制作用,是迄今為止所發(fā)現的最強凝血酶天然特異抑制劑。通過基因工程技術生產水蛭素的方法如下圖所示。請據圖回答:
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(1)過程①需要的原料是脫氧核苷酸(dNTP或dATP、dGTP、dCTP、dTTP)脫氧核苷酸(dNTP或dATP、dGTP、dCTP、dTTP),過程③必需的酶有限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶,過程④為提高導入效率,常用CaCl2CaCl2溶液處理大腸桿菌。
(2)過程②中可通過PCRPCR技術大量擴增水蛭素基因,被擴增的水蛭素基因必須有一段核苷酸序列是已知的,以便根據這一序列合成引物引物。
(3)水蛭素基因不含質粒圖譜中限制酶識別序列。為使水蛭素基因重組進該質粒,水蛭素基因兩端需分別加入不同限制酶AscⅠAscⅠ和BamHⅠBamHⅠ的識別序列。
(4)在導入重組質粒后,過程⑤為了篩選出含重組質粒的大腸桿菌,一般需要用添加卡那霉素卡那霉素的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】脫氧核苷酸(dNTP或dATP、dGTP、dCTP、dTTP);限制酶和DNA連接酶;CaCl2;PCR;引物;AscⅠ;BamHⅠ;卡那霉素
【解答】
【點評】
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