為生產(chǎn)具有特定性能的α淀粉酶,研究人員從某種海洋細菌中克隆了α淀粉酶基因(1656個堿基對),利用基因工程大量制備α淀粉酶,實驗流程見圖。請回答下列問題:
(1)利用PCR技術擴增α淀粉酶基因前,需先獲得細菌的基因組DNA基因組DNA。
(2)為了便于擴增的DNA片段與表達載體連接,需在引物的5′5′端加上限制性酶切位點,且常在兩條引物上設計加入不同的限制性酶切位點,主要目的是使DNA片段能定向插入表達載體,減少自連使DNA片段能定向插入表達載體,減少自連。
(3)進行擴增時,反應的溫度和時間需根據(jù)具體情況進行設定,下列選項中②②的設定與引物有關,⑥⑥的設定與擴增片段的長度有關。(填序號)
①變性溫度
②退火溫度
③延伸溫度
④變性時間
⑤退火時間
⑥延伸時間
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】基因組DNA;5′;使DNA片段能定向插入表達載體,減少自連;②;⑥
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/7/9 8:0:8組卷:13引用:3難度:0.7
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