正常細胞不能合成干擾素，但含有干擾素基因。我國科學家采用基因工程技術生 產干擾素a-2b已實現(xiàn)量產。具體做法是將產生干擾素的人白細胞的mRNA分級分離，反轉錄得到干擾素基因。將含有四環(huán)素、氨節(jié)青霉素抗性基因的質粒pBR322和干擾素 基因進行雙酶切，用連接酶連接。將重組載體DNA分子在一定條件下導入大腸桿菌，在 培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng)，檢測干擾素的表達量，選出高效表達的工程菌。請回答：
（1）在分化誘導因子作用下，正常細胞可以擺脫抑制、合成干擾素，該過程發(fā)生的實質是基因的選擇性表達基因的選擇性表達。
（2）據圖分析，構建重組載體DNA分子時，可以選用酶B、酶C酶B、酶C兩種限制酶對質粒pBR322和干擾素基因進行雙酶切，目的是既能保證目的基因和質粒正向連接，又能防止質粒與目的基因自身環(huán)化；防止同時破壞質粒中的兩個標記基因質粒與目的基因自身環(huán)化；防止同時破壞質粒中的兩個標記基因（答兩點）。
（3）將重組質粒導入大腸桿菌中，然后將細菌涂布到含氨芐青霉素氨芐青霉素的選擇培養(yǎng)基上培 養(yǎng)，就可得到質粒pBR322或重組質粒的細菌單菌落；再從每一個單菌落中挑取部分細 菌轉涂到含有四環(huán)素四環(huán)素的培養(yǎng)基上，不能生長的絕大部分是含有重組質粒的細菌，原因是目的基因的插入破壞了四環(huán)素抗性基因，重組質粒上只含有氨芐青霉素抗性基因，而質粒上含氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因，在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上，導入重組質粒的細菌不能生長，而只導入質粒的細菌能生長目的基因的插入破壞了四環(huán)素抗性基因，重組質粒上只含有氨芐青霉素抗性基因，而質粒上含氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因，在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上，導入重組質粒的細菌不能生長，而只導入質粒的細菌能生長。
（4）干擾素在體外保存非常困難，如果將其分子中的一個半胱氨酸變成絲氨酸，在-70℃條件下可以保存半年。實現(xiàn)這一轉變需要直接對基因基因進行修飾或改造，這屬于蛋白質工程的范疇。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】基因的選擇性表達；酶B、酶C；質粒與目的基因自身環(huán)化；防止同時破壞質粒中的兩個標記基因；氨芐青霉素；四環(huán)素；目的基因的插入破壞了四環(huán)素抗性基因，重組質粒上只含有氨芐青霉素抗性基因，而質粒上含氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因，在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上，導入重組質粒的細菌不能生長，而只導入質粒的細菌能生長；基因
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網所有，未經書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：27引用：3難度：0.6
相似題
-
1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6難度：0.7 -
2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7