擬南芥(2N=10)屬于十字花科植物,自花傳粉,被譽(yù)為“植物界的果蠅”,廣泛應(yīng)用于植物遺傳學(xué)研究。擬南芥細(xì)胞中存在某種轉(zhuǎn)錄因子能夠明顯提高其他基因的表達(dá)水平。研究人員將從擬南芥細(xì)胞中獲取的轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)移到大豆細(xì)胞內(nèi),并使其過(guò)量表達(dá),發(fā)現(xiàn)大豆中油酸和亞油酸的含量顯著提高。圖中限制酶EcoRV的酶切位點(diǎn)為-GAT↓ATC-。
(1)質(zhì)粒Po具有氨芐青霉素抗性基因(amp')和四環(huán)素抗性基因(tetr),對(duì)其進(jìn)行切割時(shí)應(yīng)該注意
所選的限制酶所識(shí)別的序列不能同時(shí)存在于氨青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因之中
所選的限制酶所識(shí)別的序列不能同時(shí)存在于氨青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因之中
,以便篩選重組質(zhì)粒。
(2)P3質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞通常使用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,若受體細(xì)胞能夠表現(xiàn)氨芐青霉素抗性,不能
不能
(填“能”或“不能”)說(shuō)明目的基因已成功導(dǎo)入受體細(xì)胞,并說(shuō)出理由:有可能是導(dǎo)入了不含目的基因的質(zhì)粒PO
有可能是導(dǎo)入了不含目的基因的質(zhì)粒PO
。
(3)受體細(xì)胞能夠培育出轉(zhuǎn)基因大豆植株的原因是 植物細(xì)胞具有全能性
植物細(xì)胞具有全能性
。
(4)為了獲得大量的目的基因,可以采用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增,PCR技術(shù)依據(jù)的原理是 DNA半保留復(fù)制
DNA半保留復(fù)制
。PCR過(guò)程每次循環(huán)分為3步,其中溫度最低的一步是 復(fù)性
復(fù)性
PCR擴(kuò)增完成后,常采用瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定PCR的產(chǎn)物。在凝膠中DNA分子的遷移速率與 凝膠的濃度
凝膠的濃度
等有關(guān)。
(5)利用PCR技術(shù),在引物的某個(gè)特定位點(diǎn)引入一個(gè)或多個(gè)不能與目的基因配對(duì)的堿基,就可以在目的基因中帶來(lái)定點(diǎn)突變,據(jù)此獲得的目的基因再經(jīng)表達(dá)、純化獲得蛋白質(zhì),該過(guò)程屬于 蛋白質(zhì)工程
蛋白質(zhì)工程
(填工程技術(shù))的范疇。