乳鐵蛋白屬于轉(zhuǎn)鐵蛋白，是乳汁中主要的鐵結(jié)合蛋白，具有免疫以及參與調(diào)節(jié)鐵代謝和細胞生長等功能。由于人乳的來源有限，不可能通過直接提取的方法來大量獲得人乳鐵蛋白，所以科研人員將人乳鐵蛋白基因進行異源表達（在其他生物體的組織細胞中表達）?；卮鹣铝袉栴}：
（1）科研人員首先從人體的 乳腺乳腺組織細胞中獲取乳鐵蛋白的mRNA，并通過 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄獲得乳鐵蛋白的cDNA，該cDNA不含內(nèi)含子的原因是 成熟的mRNA中不含內(nèi)含子的轉(zhuǎn)錄區(qū)段（mRNA在加工過程中切除了內(nèi)含子的轉(zhuǎn)錄區(qū)段）成熟的mRNA中不含內(nèi)含子的轉(zhuǎn)錄區(qū)段（mRNA在加工過程中切除了內(nèi)含子的轉(zhuǎn)錄區(qū)段）。
（2）將獲得的人乳鐵蛋白的cDNA采用PCR技術(shù)進行大量擴增。PCR擴增乳鐵蛋白基因的前提是 已知一段乳鐵蛋白基因的核苷酸序列已知一段乳鐵蛋白基因的核苷酸序列，PCR每次循環(huán)可分為 變性、復(fù)性和延伸變性、復(fù)性和延伸三步。PCR反應(yīng)所需的酶是 熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。
（3）在人乳鐵蛋白基因與質(zhì)粒構(gòu)建成的基因表達載體中，為了控制人乳鐵蛋白基因轉(zhuǎn)錄，在該基因的前后端應(yīng)分別構(gòu)建 啟動子、終止子啟動子、終止子等元件。通過顯微注射法將基因表達載體導(dǎo)入小鼠的睪丸中，將該小鼠與正常母鼠交配獲得陽性（含目的基因）子代，陽性子代中只有一半能產(chǎn)生人乳鐵蛋白，原因可能是 陽性子代中只有雌性個體能產(chǎn)生人乳鐵蛋白陽性子代中只有雌性個體能產(chǎn)生人乳鐵蛋白。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】乳腺；逆轉(zhuǎn)錄；成熟的mRNA中不含內(nèi)含子的轉(zhuǎn)錄區(qū)段（mRNA在加工過程中切除了內(nèi)含子的轉(zhuǎn)錄區(qū)段）；已知一段乳鐵蛋白基因的核苷酸序列；變性、復(fù)性和延伸；熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；啟動子、終止子；陽性子代中只有雌性個體能產(chǎn)生人乳鐵蛋白
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：7引用：4難度：0.7
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1．以下是有關(guān)分離與鑒別DNA的技術(shù)，其中說法正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/15 16:30:6組卷：5引用：1難度：0.5 -
2．科研人員克隆了豬白細胞抗原基因（SLA-2基因），構(gòu)建了該基因的真核表達載體，進行了豬腎上皮細胞表達研究。實驗的主要流程如圖1，SLA-2基因長度為1100bp,質(zhì)粒B的總長度為4445bp,其限制酶切點后的數(shù)字表示距復(fù)制原點的距離。請回答：
（1）過程①中，PCR擴增SLA-2的原理是限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ 識別序列及切割位點 T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC ，下列4種引物中應(yīng)選擇的是。
a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
（2）過程②將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的目的是，該過程需要用處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細胞。然后將大腸桿菌涂布在含有（抗生素）的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
（3）若用Sau3AⅠ和XbaⅠ完全酶切質(zhì)粒C后電泳，請在答題紙相應(yīng)位置畫出可能得到的電泳條帶。
（4）科研中常用呤霉素對真核細胞進行篩選，一般選擇最低致死濃度的前一個濃度作為篩選濃度的原因是：既可以讓大部分沒有抗性的細胞死亡又不會讓。實驗結(jié)果如圖2，根據(jù)實驗結(jié)果最佳的嘌霉素篩選濃度為。
（5）過程⑦研究人員用小鼠抗SLA抗原肽單克隆抗體檢測腎上皮細胞生產(chǎn)的抗原肽，其原理是，單克隆抗體能檢測其是否具有正確的，從而是否具有生物活性。
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：42引用：3難度：0.6 -
3．下列關(guān)于“DNA片段的擴增及電泳鑒定”的實驗，說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：3引用：1難度：0.6
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