試卷征集
加入會(huì)員
操作視頻

一種天然蛋白t-PA能高效降解因血漿纖維蛋白凝聚而成的血栓,是心梗和腦血栓的急救藥,但是心?;颊咦⑸浯髣┝康膖-PA會(huì)誘發(fā)顱內(nèi)出血。研究證實(shí),將t-PA蛋白第84位的半胱氨酸換成絲氨酸,能顯著降低其誘發(fā)出血的副作用。據(jù)此,先對天然t-PA基因的堿基序列進(jìn)行改造,然后再采取傳統(tǒng)的基因工程方法表達(dá)該改造后的基因,可制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白(注:如圖表示相關(guān)的目的基因、載體及限制酶。pCLY11為質(zhì)粒)。請回答下列問題:
菁優(yōu)網(wǎng)
(1)利用以上技術(shù)制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白的過程被稱為
蛋白質(zhì)
蛋白質(zhì)
工程。
(2)DNA重組技術(shù)中所選用的質(zhì)粒載體應(yīng)具有以下特征:質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點(diǎn),可以保證質(zhì)粒在受體細(xì)胞中能
自我復(fù)制
自我復(fù)制
;質(zhì)粒DNA分子上有
一至多個(gè)限制酶切位點(diǎn)
一至多個(gè)限制酶切位點(diǎn)
,便于外源DNA插入;質(zhì)粒DNA分子上有
有標(biāo)記基因(某種抗生素抗性基因)
有標(biāo)記基因(某種抗生素抗性基因)
,便于篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞。
(3)擬改造t-PA基因,須先獲取t-PA基因。若從cDNA文庫中獲取上t-PA基因,則從CDNA文庫中獲取的t-PA基因
不含
不含
(填“含有”或“不含”)內(nèi)含子序列。已知t-PA基因比較小,且堿基序列已經(jīng)測出,也可以通過
化學(xué)合成(人工合成)
化學(xué)合成(人工合成)
方法獲取t-PA基因。已知t-PA第84位的半胱氨酸對應(yīng)的模板鏈堿基序列為ACA,絲氨酸的密碼子為UCU。則改造后的t-PA基因第84位的絲氨酸對應(yīng)的模板鏈堿基序列應(yīng)設(shè)計(jì)為
AGA
AGA
。
(4)若改造后的t-PA基因的粘性末端如上圖所示,則需要選用限制酶
XmaⅠ
XmaⅠ
BelⅡ
BelⅡ
切割質(zhì)粒pCLY11,才能保證質(zhì)粒與t-PA改良基因高效連接。改良基因與質(zhì)粒pCLY11構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),需要
DNA連接酶
DNA連接酶
酶催化,該酶催化形成
磷酸二酯鍵
磷酸二酯鍵
鍵。
(5)以大腸桿菌作為受體細(xì)胞,在含新霉素的培養(yǎng)基中形成菌落的受體細(xì)胞并非都是目的菌株,原因是
導(dǎo)入未連目的基因的質(zhì)粒的大腸桿菌也可以在這種培養(yǎng)基上生長
導(dǎo)入未連目的基因的質(zhì)粒的大腸桿菌也可以在這種培養(yǎng)基上生長
。這時(shí)需選擇呈
色的菌落,進(jìn)一步培養(yǎng)檢測和鑒定,以選育出能生產(chǎn)改良t-PA蛋白的工程菌株。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】蛋白質(zhì);自我復(fù)制;一至多個(gè)限制酶切位點(diǎn);有標(biāo)記基因(某種抗生素抗性基因);不含;化學(xué)合成(人工合成);AGA;XmaⅠ;BelⅡ;DNA連接酶;磷酸二酯鍵;導(dǎo)入未連目的基因的質(zhì)粒的大腸桿菌也可以在這種培養(yǎng)基上生長;白
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:17引用:1難度:0.6
相似題
  • 1.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題:
    (1)在進(jìn)行基因工程操作時(shí),先要從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA,以mRNA為材料可以獲得cDNA,其原理是
     

    (2)若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá),需要構(gòu)建基因表達(dá)載體,其組成除了幾丁質(zhì)酶基因外,還包括
     
    、
     
    、
     
    ,其中
     
    與目的基因的轉(zhuǎn)錄開始有關(guān)。
    (3)當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)如何從個(gè)體水平鑒定轉(zhuǎn)基因植物有無抗真菌病的能力?
     
    。
    (5)若幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中獲得了轉(zhuǎn)基因植株,但植株抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/10/31 8:0:1組卷:4引用:1難度:0.7
  • 2.已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-,根據(jù)圖示分析下列敘述正確的是(  )
    菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/10/31 13:0:2組卷:46引用:2難度:0.7
  • 3.下列關(guān)于質(zhì)粒的說法錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/1 15:30:1組卷:23引用:2難度:0.7
小程序二維碼
把好題分享給你的好友吧~~
APP開發(fā)者:深圳市菁優(yōu)智慧教育股份有限公司 | 應(yīng)用名稱:菁優(yōu)網(wǎng) | 應(yīng)用版本:4.8.2  |  隱私協(xié)議      第三方SDK     用戶服務(wù)條款廣播電視節(jié)目制作經(jīng)營許可證出版物經(jīng)營許可證網(wǎng)站地圖本網(wǎng)部分資源來源于會(huì)員上傳,除本網(wǎng)組織的資源外,版權(quán)歸原作者所有,如有侵犯版權(quán),請立刻和本網(wǎng)聯(lián)系并提供證據(jù),本網(wǎng)將在三個(gè)工作日內(nèi)改正