中國甜柿的自然脫澀與乙醛代謝關鍵酶基因（PDC）密切相關，推測澀味程度可能與PDC基因的表達情況有關。為篩選PDC基因的調控蛋白，科研人員構建了質粒A和質粒G（ 如圖1、圖2 所示），利用酵母菌進行了相關實驗探究。
（1）啟動子位于基因首端，是RNA聚合酶識別和結合RNA聚合酶識別和結合的位點，啟動子區(qū)域還存在著許多調控蛋白的結合位點，可影響基因的轉錄水平。PDC基因的啟動子序列未知，為獲得大量該基因啟動子所在片段，可利用限制酶將基因組DNA進行酶切，然后在DNA連接酶DNA連接酶的作用下將已知序列信息的接頭片段連接在PDC基因的上游，根據接頭片段和PDC基因編碼序列設計引物進行PCRPCR。
（2）利用質粒A構建含有PDC基因啟動子片段的重組質粒并導入代謝缺陷型酵母菌，用不含尿嘧啶尿嘧啶的培養(yǎng)基可篩選出成功轉化的酵母菌Y1H。質粒G上的AD基因表達出的AD蛋白與啟動子足夠靠近時，能夠激活后續(xù)基因轉錄，因此需獲得待測蛋白與AD蛋白的融合蛋白用于后續(xù)篩選?？蒲腥藛T從中國甜柿中提取RNA，將逆轉錄形成的各種cDNAcDNA與質粒G連接后導入酵母菌，此時應選擇質粒G中的位點22（填序號1～5）作為cDNA的插入位點，最終獲得攜帶不同cDNA片段的酵母菌群Y187。
（3）重組酵母Y187與Y1H能夠進行接合生殖，形成的接合子含有兩種酵母菌質粒上的所有基因。若接合子能在含有金擔子素的培養(yǎng)基中生存，則推測待測蛋白是PDC基因的調控蛋白，請結合圖3闡述作出該推測的理由接合子中待測蛋白與AD蛋白形成了融合蛋白，若待測蛋白是PDC基因的調控蛋白，就能與PDC基因啟動子結合，AD蛋白也能靠近PDC基因啟動子并激活金擔子素抗性基因的表達，使酵母菌表現出金擔子素抗性接合子中待測蛋白與AD蛋白形成了融合蛋白，若待測蛋白是PDC基因的調控蛋白，就能與PDC基因啟動子結合，AD蛋白也能靠近PDC基因啟動子并激活金擔子素抗性基因的表達，使酵母菌表現出金擔子素抗性。
（4）篩選出 PDC 基因的調控蛋白后，為滿足生產上的需要對其進行改良，這種技術屬于蛋白質蛋白質工程，該工程的起點是預期蛋白質的功能預期蛋白質的功能。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】RNA聚合酶識別和結合；DNA連接酶；PCR；尿嘧啶；cDNA；2；接合子中待測蛋白與AD蛋白形成了融合蛋白，若待測蛋白是PDC基因的調控蛋白，就能與PDC基因啟動子結合，AD蛋白也能靠近PDC基因啟動子并激活金擔子素抗性基因的表達，使酵母菌表現出金擔子素抗性；蛋白質；預期蛋白質的功能
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：104引用：6難度：0.5
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6難度：0.7 -
2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
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