由致病疫霉引起的晚疫病是造成馬鈴薯嚴(yán)重減產(chǎn)的毀滅性病害。馬鈴薯野生種中含有抗晚疫病基因,但由于存在生殖隔離,難以通過(guò)常規(guī)雜交育種方法將其導(dǎo)入栽培種中??蒲腥藛T利用抗病的二倍體馬鈴薯野生種(2n=24)和易感病的四倍體馬鈴薯栽培種(4n=48)進(jìn)行體細(xì)胞雜交,培育抗晚疫病馬鈴薯。
(1)將馬鈴薯野生種和栽培種的葉片用
纖維素酶和果膠
纖維素酶和果膠
酶處理,獲得有活力的原生質(zhì)體,加入 聚乙二醇(PEG)
聚乙二醇(PEG)
試劑誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合。將融合細(xì)胞形成的愈傷組織接種到含有 植物激素(生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素等)
植物激素(生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素等)
和營(yíng)養(yǎng)的培養(yǎng)基上,發(fā)育形成完整的再生植株。
(2)如圖是對(duì)雙親及再生植株的基因組DNA特異性片段進(jìn)行體外擴(kuò)增后的電泳結(jié)果。圖中泳道 3
3
代表再生植株,判斷依據(jù)是 3同時(shí)具有1和2的DNA特異性片段
3同時(shí)具有1和2的DNA特異性片段
。
(3)科研人員借助流式細(xì)胞儀測(cè)定馬鈴薯野生種、馬鈴薯栽培種和再生植株的DNA相對(duì)含量,由結(jié)果推測(cè)再生植株為 六
六
倍體,理由是 再生植株細(xì)胞中DNA相對(duì)含量為150,由一個(gè)四倍體馬鈴薯栽培種原生質(zhì)體和一個(gè)二倍體馬鈴薯野生種原生質(zhì)體融合得到的雜種細(xì)胞發(fā)育而來(lái)
再生植株細(xì)胞中DNA相對(duì)含量為150,由一個(gè)四倍體馬鈴薯栽培種原生質(zhì)體和一個(gè)二倍體馬鈴薯野生種原生質(zhì)體融合得到的雜種細(xì)胞發(fā)育而來(lái)
。
(4)為確定該再生植株是否符合育種要求,還需對(duì)其進(jìn)行 晚疫病抗性
晚疫病抗性
鑒定。