實時熒光RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄PCR)在診斷新型冠狀病毒感染中發(fā)揮著關(guān)鍵作用,其具體的過程為:從樣品中提取RNA→DNA→PCR擴增→熒光檢測。請回答下列問題:
(1)RT-PCR的試劑盒包含Taq酶、引物、緩沖試劑等,除此之外,還應(yīng)包含逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶。反應(yīng)體系中加入dATP、dTTP、dCTP和dGTP的作用是提供反應(yīng)所需的原料和能量提供反應(yīng)所需的原料和能量。
(2)核酸檢測樣本多采集于咽、鼻,這些部位存在多種微生物,提取物中核酸種類可能有多種。但利用該“試劑盒”,通過PCR技術(shù)可專一性地對新型冠狀病毒的核酸序列進行擴增,其原因是引物是根據(jù)新型冠狀病毒核酸的一段已知序列設(shè)計合成引物是根據(jù)新型冠狀病毒核酸的一段已知序列設(shè)計合成。
(3)抗體療法是針對新冠肺炎的臨床試驗療法之一,新冠肺炎康復(fù)者的血清中可以分離出相應(yīng)抗體,但這種從血清中分離抗體的方法存在產(chǎn)量低、純度低、特異性差產(chǎn)量低、純度低、特異性差的缺點。單克隆抗體技術(shù)為治療新冠肺炎提供了一種可能的發(fā)展方向。在單克隆抗體制備過程中,需從已免疫的個體獲得B淋巴B淋巴細胞,但在實際生產(chǎn)中通常不會對該種細胞進行連續(xù)培養(yǎng),主要原因是該細胞不能無限增殖該細胞不能無限增殖。
(4)單克隆抗體制備過程中,經(jīng)選擇性培養(yǎng)獲得的雜交瘤細胞,還需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。單克隆抗體除作體外診斷試劑外,還可用于治療疾病和運載藥物運載藥物。
【答案】逆轉(zhuǎn)錄;提供反應(yīng)所需的原料和能量;引物是根據(jù)新型冠狀病毒核酸的一段已知序列設(shè)計合成;產(chǎn)量低、純度低、特異性差;B淋巴;該細胞不能無限增殖;克隆化培養(yǎng)和抗體檢測;運載藥物
【解答】
【點評】
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限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ 識別序列及切割位點 T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC
a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
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