結直腸癌是常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤,研究表明80%患者的A基因(腫瘤抑制基因)突變,而患者逐漸年輕化被認為與晝夜節(jié)律紊亂有關。研究人員對晝夜節(jié)律紊亂、A基因突變與腫瘤發(fā)生三者之間的聯(lián)系展開研究。
(1)A基因突變產(chǎn)生A-基因,A-表達的錯誤蛋白不行使正常功能且會干擾正常A蛋白發(fā)揮作用。科研人員利用Cre-loxP系統(tǒng)構建易患結直腸癌的A基因雜合突變模型鼠,且只允許突變基因A-在該鼠的腸上皮細胞表達。
①圖1所示的Cre-loxP系統(tǒng)的工作原理為:利用 限制限制酶和DNA連接酶在啟動子和目標基因間插入loxP-Stop-loxP序列,目標基因不轉錄。Cre酶可識別loxP序列并切割DNA分子,敲除 Stop(和一個loxP)Stop(和一個loxP)序列,目標基因轉錄。
②欲獲得A基因雜合突變模型鼠,研究人員需對野生型甲鼠和乙鼠分別轉基因,從甲、乙雜交后代中篩選目標個體。請依據(jù)圖1原理設計出導入甲鼠和乙鼠的基因及其調(diào)控序列 (填寫選項前的字母)。
a.A(A-)基因的啟動子
b.使基因只在腸上皮細胞表達的啟動子
c.loxP-Stop-loxP
d.A基因
e.A-基因
f.Cre酶基因
(2)科研人員又獲得了節(jié)律基因B純合突變的模型鼠和A基因雜合突變、B基因純合突變的雙突變模型鼠,觀察野生型(WT)與各模型鼠的腸道腫瘤生長情況(圖2)。
①據(jù)圖2分析,A、B基因與結直腸癌發(fā)生的關系可表述為 B的突變可加強A突變對結直腸癌發(fā)生的促進作用B的突變可加強A突變對結直腸癌發(fā)生的促進作用。
②檢測發(fā)現(xiàn)雙突變模型鼠的A基因mRNA含量幾乎為0,說明 B基因突變抑制A基因的轉錄(或表達)B基因突變抑制A基因的轉錄(或表達)。
(3)A基因表達的A蛋白參與W為信號的調(diào)節(jié)通路(圖3),該通路在結直腸癌發(fā)病機制中發(fā)揮重要作用。
①W與受體結合激活D蛋白,使 β蛋白降解復合物合成被抑制,β蛋白積累并進入細胞核與促增殖基因的轉錄因子結合β蛋白降解復合物合成被抑制,β蛋白積累并進入細胞核與促增殖基因的轉錄因子結合,促進促增殖基因表達,細胞快速增殖。
②科研人員從(2)的1~4組小鼠小腸中分離干細胞進行離體培養(yǎng),培養(yǎng)基中含促進干細胞分泌W蛋白的因子。每組培養(yǎng)物分別用0、1、10和100nmol四個濃度的W合成抑制劑處理,預期各組細胞增殖速率的變化為 隨W合成抑制劑濃度升高,1、2、3組增殖速率逐漸降低,4組無明顯變化隨W合成抑制劑濃度升高,1、2、3組增殖速率逐漸降低,4組無明顯變化。
【答案】限制;Stop(和一個loxP);;B的突變可加強A突變對結直腸癌發(fā)生的促進作用;B基因突變抑制A基因的轉錄(或表達);β蛋白降解復合物合成被抑制,β蛋白積累并進入細胞核與促增殖基因的轉錄因子結合;隨W合成抑制劑濃度升高,1、2、3組增殖速率逐漸降低,4組無明顯變化
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:35引用:1難度:0.5
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