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Cre酶是一種重組酶,LoxP是能被Cre酶識(shí)別的特異DNA序列,當(dāng)一條DNA鏈上存在兩個(gè)相同的LoxP序列且方向相同時(shí),Cre酶能有效切除兩個(gè)位點(diǎn)間的DNA序列(如圖1)。因此Cre/LoxP重組酶系統(tǒng)能夠?qū)崿F(xiàn)特異位點(diǎn)的基因敲除、基因插入等操作。菁優(yōu)網(wǎng)
(1)啟動(dòng)子的功能是
驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA
驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA
;Cre酶與限制酶的功能類似,能將特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的
磷酸二酯鍵
磷酸二酯鍵
斷開。
(2)據(jù)上圖分析,若細(xì)胞中不含有Cre酶,轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)序列就會(huì)抑制下游GFP基因起作用,細(xì)胞無(wú)法發(fā)出熒光;若細(xì)胞中含有Cre酶,Cre酶會(huì)切除
轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)序列和LoxP
轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)序列和LoxP
,GFP基因就會(huì)
表達(dá)
表達(dá)
,合成綠色熒光蛋白。
(3)當(dāng)細(xì)胞中存在多對(duì)Cre酶識(shí)別位點(diǎn)和熒光基因時(shí),只有在啟動(dòng)子之后且與啟動(dòng)子相鄰的熒光蛋白基因才會(huì)表達(dá),借助大腦成像技術(shù),通過熒光蛋白“點(diǎn)亮”大腦內(nèi)的神經(jīng)元,試驗(yàn)小鼠不同的腦組織細(xì)胞就會(huì)呈現(xiàn)不同的顏色,出現(xiàn)“腦彩虹”。
①若利用PCR技術(shù)擴(kuò)增LoxP基因,需要的引物有
B、C
B、C
(從圖2中A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選擇)。PCR反應(yīng)完成后,常采用
瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳
來鑒定PCR的產(chǎn)物。
②研究者利用限制酶和
DNA連接酶
DNA連接酶
酶構(gòu)建了含有熒光蛋白基因和Cre酶識(shí)別序列的基因表達(dá)載體(圖3),并將其導(dǎo)入小鼠細(xì)胞中,培育出了轉(zhuǎn)基因小鼠。若該小鼠腦細(xì)胞中存在Cre酶且僅識(shí)別LoxP2時(shí),腦細(xì)胞的色彩為
黃色和藍(lán)色
黃色和藍(lán)色

【答案】驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA;磷酸二酯鍵;轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)序列和LoxP;表達(dá);B、C;瓊脂糖凝膠電泳;DNA連接酶;黃色和藍(lán)色
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/7/7 8:0:9組卷:14引用:2難度:0.6
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  • 1.繼哺乳動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后,膀胱生物反應(yīng)器的研究也取得了一定進(jìn)展。最近,科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并分泌到尿液中。以下敘述錯(cuò)誤的是(  )

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:55引用:2難度:0.7
  • 2.請(qǐng)回答下列與基因工程和胚胎工程有關(guān)的問題:
    (1)幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。在進(jìn)行基因工程操作時(shí),可以從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的
     
    ,以其為材料通過逆轉(zhuǎn)錄可以獲得cDNA.若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基、因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     

    (2)在“試管?!钡呐嘤^程中,要使精子和卵母細(xì)胞在體外成功結(jié)合,需要對(duì)精子進(jìn)行
     
    處理。卵子是否受精的重要標(biāo)志是
     
    。
    (3)通常牛每次排出一枚卵母細(xì)胞,采用
     
    激素處理可使其超數(shù)排卵。在核移植過程中,作為受體的成熟卵母細(xì)胞在核移植前需要進(jìn)行
     
    處理。
    (4)在胚胎移植前,通過
     
    技術(shù)可獲得較多胚胎,進(jìn)行該項(xiàng)技術(shù)時(shí),應(yīng)選用發(fā)育良好的、形態(tài)正常的
     
    。

    發(fā)布:2024/10/31 8:0:1組卷:4引用:1難度:0.7
  • 3.2022年1月7日,醫(yī)學(xué)專家首次將經(jīng)基因改造的豬的心臟移植入一名心臟病人體內(nèi),盡管移植的心臟只在患者體內(nèi)正常跳動(dòng)了兩個(gè)月,但這依然是一次非常有意義的嘗試。下列說法錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/10/27 3:30:2組卷:12引用:1難度:0.7
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