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中國甜柿的自然脫澀與乙醛代謝關鍵酶基因(PDC)密切相關,推測澀味程度可能與PDC基因的表達情況有關。
(1)啟動子位于基因首端,是RNA聚合酶識別和結合的位點,同時啟動子區(qū)域還存在著許多調控蛋白的結合位點,RNA聚合酶和調控蛋白共同影響了基因的
轉錄水平
轉錄水平
。
(2)為篩選PDC基因的調控蛋白,科研人員進行了下列實驗。
①PDC基因的啟動子序列未知,為獲得大量該基因啟動子所在片段,可利用限制酶將基因組DNA進行酶切,然后在
DNA連接酶
DNA連接酶
的作用下將已知序列信息的接頭片段連接在PDC基因的上游,根據(jù)
接頭片段
接頭片段
和PDC基因編碼序列設計引物進行PCR.利用質粒A(圖1)構建含有PDC基因啟動子片段的重組質粒并導入代謝缺陷型酵母菌,用不含
尿嘧啶
尿嘧啶
的培養(yǎng)基可篩選出成功轉化的酵母菌Y1H。
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②質粒G(圖2)上的AD基因表達出的AD蛋白與啟動子足夠靠近時,能夠激活后續(xù)基因轉錄,因此需獲得待測蛋白與AD蛋白的融合蛋白用于后續(xù)篩選。科研人員從中國甜柿中提取RNA,將逆轉錄形成的各種cDNA與質粒G連接后導入酵母菌,此時應選擇質粒G中的位點
4
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(填序號1~5)作為cDNA的插入位點,最終獲得攜帶不同cDNA片段的酵母菌群Y187。
③重組酵母Y187與Y1H能夠進行接合生殖,形成的接合子含有兩種酵母菌質粒上的所有基因。若接合子能在含有金擔子素的培養(yǎng)基中生存,則推測待測蛋白是PDC基因的調控蛋白,請結合圖示闡述作出該推測的理由。

【答案】轉錄水平;DNA連接酶;接頭片段;尿嘧啶;4
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/11/11 0:0:2組卷:82引用:2難度:0.7
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    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質粒,則產(chǎn)生的DNA片段的長度為( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/14 4:0:2組卷:89引用:9難度:0.7
  • 2.基因工程在農牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速,如圖表示利用基因工程技術生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/11/14 7:0:1組卷:62引用:7難度:0.7
  • 3.經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應,嚴重時甚至危及生命,因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶(MCO)能高效分解生物胺,基于基因工程規(guī)?;a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因,然后轉入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
    (1)通過上述基因工程技術獲取目標產(chǎn)物,涉及如下步驟,則合理的操作步驟排序是
     
    (填寫下列編號)。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)模化生產(chǎn)目標蛋白
    ④目的基因導入受體細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構建表達載體
    (2)在PCR過程中,引物的功能是
     

    A.啟動DNA復制
    B.規(guī)定擴增區(qū)間
    C.解旋DNA雙鏈
    D.充當復制模板
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    (3)為獲得目的基因MCO(圖甲灰色表示的序列),正確設計的PCR引物應為圖甲中的
     
    。
    (4)獲取目的基因后,需要和載體重組導入受體細胞。載體的化學本質是
     
    (填DNA或RNA/DNA或RNA)。
    (5)在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應中,溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    (6)若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端,那么載體質粒pCLY15(圖丙中圖1)需用
     
     
    切開,才能與MCO片段高效連接。
    (7)下列實驗操作中,能有效鑒別載體質粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A.從抗藥性克隆中提取質粒DNA,用合適的限制酶切割
    B.在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑,以克隆的顏色進行鑒別
    C.從抗藥性克隆中提取質粒DNA,以此為模板進行PCR檢測
    D.將Ap抗性克隆轉移至含Tc(四環(huán)素)的平板上,根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布:2024/11/14 4:30:2組卷:29引用:3難度:0.5
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