真核生物基因中通常有內(nèi)含子,而原核生物基因中沒有,原核生物沒有真核生物所具有的切除內(nèi)含子對應(yīng)的RNA序列的機(jī)制。已知在人體中基因A(有內(nèi)含子)可以表達(dá)出某種特定蛋白(簡稱蛋白A)?;卮鹣铝袉栴}:
(1)科學(xué)家采用
反(逆)轉(zhuǎn)錄
反(逆)轉(zhuǎn)錄
法,即以mRNA為模板最終合成了人的基因A。以該基因作為目的基因?qū)氪竽c桿菌得到了蛋白A,卻沒有受到原核生物內(nèi)含子對應(yīng)RNA序列切除機(jī)制的限制,其原因是逆轉(zhuǎn)錄法得到的基因A沒有內(nèi)含子,在大腸桿菌中無需切除內(nèi)含子對應(yīng)的RNA序列,因此可表達(dá)出蛋白A
逆轉(zhuǎn)錄法得到的基因A沒有內(nèi)含子,在大腸桿菌中無需切除內(nèi)含子對應(yīng)的RNA序列,因此可表達(dá)出蛋白A
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(2)與動、植物細(xì)胞比較,選用大腸桿菌作為受體細(xì)胞,可高效地獲得蛋白A,這是因?yàn)榇竽c桿菌具有繁殖快、容易培養(yǎng)、代謝旺盛
繁殖快、容易培養(yǎng)、代謝旺盛
(答出 兩點(diǎn)即可)等優(yōu)點(diǎn)。
(3)若要檢測基因A是否已成功導(dǎo)入大腸桿菌,可用放射性標(biāo)記的基因A
放射性標(biāo)記的基因A
部分DNA片段作為探針,檢測抽樣大腸桿菌所提取的DNA中是否含有基因A。為使檢測結(jié)果更精確,往往需擴(kuò)增待檢DNA樣品中的目的基因數(shù)量。為特異性擴(kuò)增該段序列而非其他序列,必須設(shè)計(jì)并添加到擴(kuò)增體系中的是兩種引物
兩種引物
。即使檢測到基因A已導(dǎo)入大腸桿菌,也不能說明其已成功表達(dá)。可采用抗原-抗體雜交
抗原-抗體雜交
的方法,檢測大腸桿菌已產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白產(chǎn)品。
(4)艾弗里等人的肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)為證明DNA是遺傳物質(zhì)做出了重要貢獻(xiàn),也可以說是基因工程的先導(dǎo),如果說他們的工作為基因工程理論的建立提供了啟示,那么,這一啟示是DNA可以從一種生物個體轉(zhuǎn)移到另一種生物個體
DNA可以從一種生物個體轉(zhuǎn)移到另一種生物個體
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