當(dāng)前位置： 2022年甘肅省武威十八中高考生物六模試卷> 試題詳情

CRISPR/Cas9是一種高效的基因編輯技術(shù)，Cas9基因表達(dá)的Cas9蛋白像一把“分子剪刀”，在單鏈向?qū)NA（SgRNA）引導(dǎo)下，切割DNA雙鏈以敲除目標(biāo)基因或插入新的基因。CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)的工作原理如圖所示。

回答下列問題。
（1）過程①中，為構(gòu)建CRISPR/Cas9重組質(zhì)粒，需對(duì)含有特定sgRNA編碼序列的DNA進(jìn)行酶切處理，然后將其插入到經(jīng)相同酶切處理過的質(zhì)粒上，插入時(shí)所需要的酶是
DNA連接酶
DNA連接酶
。
（2）過程②中，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞的方法是
感受態(tài)細(xì)胞法
感受態(tài)細(xì)胞法
。
（3）過程③～⑤中，SgRNA與Cas9蛋白形成復(fù)合體，該復(fù)合體中的SgRNA可識(shí)別并與目標(biāo)DNA序列特異性結(jié)合，二者結(jié)合所遵循的原則是
堿基互補(bǔ)配對(duì)原則
堿基互補(bǔ)配對(duì)原則
。隨后，Cas9蛋白可切割
目標(biāo)DNA特定的核苷酸
目標(biāo)DNA特定的核苷酸
序列。
（4）利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)敲除一個(gè)長度為1200bp的基因，在DNA水平上判斷基因敲除是否成功所采用的方法是
DNA分子雜交技術(shù)
DNA分子雜交技術(shù)
，基因敲除成功的判斷依據(jù)是
出現(xiàn)雜交帶
出現(xiàn)雜交帶
。
（5）某種蛋白酶可高效降解羽毛中的角蛋白?？蒲腥藛T將該蛋白酶基因插入到CRISPR/Cas9質(zhì)粒中獲得重組質(zhì)粒，隨后將其導(dǎo)入到大腸桿菌細(xì)胞，通過基因編輯把該蛋白酶基因插入到基因組DNA中，構(gòu)建得到能大量分泌該蛋白酶的工程菌。據(jù)圖簡述CRISPR/Cas9重組質(zhì)粒在受體細(xì)胞內(nèi)，將該蛋白酶基因插入到基因組DNA的編輯過程：
CRISPR/Cas9重組質(zhì)粒在受體細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物是SgRNA，表達(dá)的產(chǎn)物是Cas9蛋白，二者形成復(fù)合體，該復(fù)合體中的SgRNA可識(shí)別并與目標(biāo)DNA序列特異性結(jié)合，從而插入到基因組DNA中
CRISPR/Cas9重組質(zhì)粒在受體細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物是SgRNA，表達(dá)的產(chǎn)物是Cas9蛋白，二者形成復(fù)合體，該復(fù)合體中的SgRNA可識(shí)別并與目標(biāo)DNA序列特異性結(jié)合，從而插入到基因組DNA中
。

【答案】DNA連接酶；感受態(tài)細(xì)胞法；堿基互補(bǔ)配對(duì)原則；目標(biāo)DNA特定的核苷酸；DNA分子雜交技術(shù)；出現(xiàn)雜交帶；CRISPR/Cas9重組質(zhì)粒在受體細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物是SgRNA，表達(dá)的產(chǎn)物是Cas9蛋白，二者形成復(fù)合體，該復(fù)合體中的SgRNA可識(shí)別并與目標(biāo)DNA序列特異性結(jié)合，從而插入到基因組DNA中

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：269引用：2難度：0.7

相似題

1．如圖為某生物的一種多肽酶的基因內(nèi)部和周圍的DNA組成情況．其中標(biāo)出了轉(zhuǎn)錄的起始部位（ ini）和終止部位（ter），翻譯的起始密碼子對(duì)應(yīng)序列（sta）的第一個(gè)堿基的位置，終止密碼子對(duì)應(yīng)序列（ sto）的第一個(gè)堿基的位置，以及基因中內(nèi)含子的界限（↓）（距離以kb表示，但未按比例畫出）．

（1）轉(zhuǎn)錄的起始部位稱為

，是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶

的部位．
（2）基因工程中的目的基因主要是指

的基因．該基因來自

（填“基因組文庫”或“cDNA文庫”）．
（3）翻譯時(shí)與密碼子發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)的是轉(zhuǎn)運(yùn)RNA上的反密碼子，該物質(zhì)的主要功能是

．可用抗原-抗體雜交的方法檢驗(yàn)翻譯的產(chǎn)物，若有

出現(xiàn)，則表明目的基因表達(dá)出相應(yīng)的產(chǎn)物．
（4）基因工程在原則上只能產(chǎn)生

的蛋白質(zhì)．蛋白質(zhì)工程是以蛋白質(zhì)分子的

及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)．
發(fā)布：2024/11/2 8:0:1組卷：21引用：2難度：0.1
解析
2．單子葉植物甲具有極強(qiáng)的耐旱性，其耐旱性與某個(gè)基因有關(guān)。若從該植物中獲得該耐旱基因，并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性較弱的雙子葉植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。請(qǐng)回答下列問題：
（1）理論上，

文庫含生物的全部基因；而

文庫中含有生物的部分基因。
（2）若要從植物甲的基因文庫中篩選出耐旱基因，從分子角度看最直接的信息是根據(jù)組成耐旱基因的

排列順序，最間接的信息是根據(jù)耐旱基因翻譯的產(chǎn)物

的特性。
（3）將耐旱基因?qū)腚p子葉植物乙時(shí)，采用最多的方法是

，再經(jīng)過一系列的過程得到再生植株。要確認(rèn)該耐旱基因是否在再生植株中穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性，除了進(jìn)行分子水平的

外，有時(shí)還需要進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的

。
（4）假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比3：1時(shí)，則可推測(cè)該耐旱基因整合到了

（填“同源染色體的一條上”或“同源染色體的兩條上”）。
發(fā)布：2024/11/2 8:0:1組卷：1引用：1難度：0.7
解析
3．從基因文庫中獲取目的基因可以根據(jù)下列哪些信息（　　）
①基因的核苷酸序列； ②基因的功能； ③基因在染色體上的位置；
④基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA； ⑤基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)．
A．①②③④⑤ B．①③④⑤ C．②③④⑤ D．①②③④
發(fā)布：2024/11/2 8:0:1組卷：2引用：1難度：0.9
解析

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3．從基因文庫中獲取目的基因可以根據(jù)下列哪些信息（ ）①基因的核苷酸序列； ②基因的功能； ③基因在染色體上的位置；④基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA； ⑤基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)．

3．從基因文庫中獲取目的基因可以根據(jù)下列哪些信息（　　）
①基因的核苷酸序列； ②基因的功能； ③基因在染色體上的位置；
④基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA； ⑤基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)．