DNA的復(fù)制方式,可以通過設(shè)想來進(jìn)行預(yù)測,可能的情況是全保留復(fù)制、半保留復(fù)制、分散(彌散)復(fù)制三種。究竟是哪種復(fù)制方式呢?用下列設(shè)計實驗來證明DNA的復(fù)制方式。
實驗步驟:
a.在氮源為14N的培養(yǎng)基中生長的大腸桿菌,其DNA分子均為14N-DNA(對照);
b.在氮源為15N的培養(yǎng)基中生長的大腸桿菌,其DNA分子均為15N-DNA(親代);
c.將親代15N大腸桿菌轉(zhuǎn)移到氮源為含14N的培養(yǎng)基中,再連續(xù)繁殖兩代(Ⅰ和Ⅱ),用密度梯度離心法分離,不同分子量的DNA分子將分布在試管中的不同位置上。
(注:輕密度帶是指DNA只含14N,中密度帶是指DNA含14N15N,重密度帶是指DNA只含15N)
實驗預(yù)測:
(1)如果與對照(14N/14N)相比,子代Ⅰ能分辨出兩條DNA帶:一條 輕密度(14N/14N)輕密度(14N/14N)帶和一條 重密度(15N/15N)重密度(15N/15N)帶,則可以排除 半保留復(fù)制半保留復(fù)制和分散復(fù)制。
(2)如果子代Ⅰ只有一條中密度帶,則可以排除 全保留復(fù)制全保留復(fù)制,但不能肯定是 半保留復(fù)制半保留復(fù)制或 分散復(fù)制分散復(fù)制。
(3)如果子代Ⅰ只有一條中密度帶,再繼續(xù)做子代ⅡDNA密度鑒定:若子代Ⅱ可以分出 一條中密度帶一條中密度帶和 一條輕密度帶一條輕密度帶,則可以排除分散復(fù)制,同時肯定是半保留復(fù)制;如果子代Ⅱ不能分出 中、輕中、輕兩條密度帶,則排除 半保留復(fù)制半保留復(fù)制,同時確定為 分散復(fù)制分散復(fù)制。
【考點】證明DNA半保留復(fù)制的實驗.
【答案】輕密度(14N/14N);重密度(15N/15N);半保留復(fù)制;全保留復(fù)制;半保留復(fù)制;分散復(fù)制;一條中密度帶;一條輕密度帶;中、輕;半保留復(fù)制;分散復(fù)制
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:7引用:2難度:0.6
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1.DNA半不連續(xù)復(fù)制假說是指DNA復(fù)制時,一條子鏈連續(xù)形成,另一條子鏈先形成短片段后再進(jìn)行連接(如圖1)。為驗證假說,某小組進(jìn)行如下實驗:培養(yǎng)T4噬菌體→于不同時刻分離噬菌體DNA→加熱→離心→檢測相應(yīng)位置DNA單鏈片段含量,結(jié)果如圖2。下列相關(guān)敘述錯誤的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/10/23 2:0:1組卷:41引用:3難度:0.7 -
2.在氮源為14N和15N的培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌,其DNA分子分別為14N-DNA(相對分子質(zhì)量為a)和15N-DNA(相對分子質(zhì)量為b)。將含15N-DNA的親代大腸桿菌轉(zhuǎn)移到含14N的培養(yǎng)基上,再連續(xù)繁殖兩代(Ⅰ和Ⅱ),用某種離心方法分離得到的結(jié)果如圖所示。下列對此實驗的敘述不正確的是( )
發(fā)布:2024/11/2 1:30:2組卷:167引用:41難度:0.7 -
3.大腸桿菌是研究DNA復(fù)制特點的理想材料,根據(jù)下表實驗作答。
實驗 細(xì)菌 培養(yǎng)及取樣 操作(密度梯度離心和放射自顯影) 實驗結(jié)果 1 大陸桿菌 含3H標(biāo)記的dTTP(胸腺嘧啶脫氧核糖核苷三磷酸)的液體培養(yǎng)基、30秒取樣 分離DNA,堿性條件變性(雙鏈分開) 被3H標(biāo)記的片段,一半是1000~2000個堿基的DNA小片段,而另一半則是長很多的DNA大片段。 2 大腸桿菌 含3H標(biāo)記的dTTP(胸腺嘧啶脫氧核糖核苷三磷酸)的液體培養(yǎng)基,3分鐘取樣 同上 被3H標(biāo)記的片段大多數(shù)是DNA大片段。 3 DNA連接酶突變型大腸桿菌 含3H標(biāo)記的dTTP(胸腺嘧啶脫氧核糖核苷三磷酸)的液體培養(yǎng)基,3分鐘取樣 同上 同實驗1
(2)實驗2實驗結(jié)果表明,一半DNA大片段具有放射性,一半DNA大片段無放射性,
(3)實驗1結(jié)果表明,被3H標(biāo)記的DNA片段,一半是1000~2000個堿基的小片段,另一半是大片段,說明DNA復(fù)制過程中,一條鏈的復(fù)制是連續(xù)的,另一條是
(4)以上實驗表明,大腸桿菌所形成的1000~2000個堿基的小片段子鏈需要發(fā)布:2024/10/4 7:0:1組卷:13引用:1難度:0.5
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