亞麻酸（ALA）能夠促進卵母細胞體外成熟和囊胚發(fā)育。為了給水牛體外胚胎產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)中合理使用亞麻酸提供理論依據(jù)，科研人員研究了不同濃度的亞麻酸對水牛卵母細胞體外成熟、早期胚胎發(fā)育的影響。分析回答：
①卵母細胞的收集和體外培養(yǎng)：從屠宰場水牛的卵巢中收集并處理卵母細胞，隨機分成5組，分別置于不同濃度亞麻酸的培養(yǎng)液中，在39℃、5%CO₂的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)22～24h。
②卵母細胞成熟判斷：在顯微鏡下觀察卵母細胞，判斷其是否成熟，統(tǒng)計結(jié)果如表1。
③體外受精：在受精溶液中進行體外受精后，用顯微鏡觀察判斷是否完成受精。
④早期胚胎培養(yǎng)：將受精卵移入胚胎培養(yǎng)液中培養(yǎng)44～48h后檢查分裂情況，每隔48h更換一次培養(yǎng)液，第5～9天觀察囊胚發(fā)育情況，統(tǒng)計結(jié)果如表2。
表1亞麻酸對水牛卵母細胞體外成熟的影響

ALA濃度/μmol?L-1	卵母細胞數(shù)	核成熟卵子數(shù)
0	229	137
10	201	133
50	227	166
100	215	137
200	215	135

表2亞麻酸對水牛早期胚胎發(fā)育的影響

ALA濃度/μmol?L-1	培養(yǎng)卵數(shù)	分裂數(shù)	囊胚數(shù)
0	309	171	75
10	325	182	82
50	292	185	97
100	310	188	84
200	231	145	68

（1）步驟①中，細胞培養(yǎng)箱中加5%CO₂ 的作用是

維持培養(yǎng)液的pH

維持培養(yǎng)液的pH

。
（2）步驟②中，成熟卵母細胞才可以進行受精，此時其細胞內(nèi)染色體的行為特征是

染色體的著絲點排列在赤道板上

染色體的著絲點排列在赤道板上

。步驟③中，判斷是否受精的依據(jù)是

在卵細胞膜和透明帶的間隙可否觀察到兩個極體

在卵細胞膜和透明帶的間隙可否觀察到兩個極體

。
（3）步驟④中，具32個細胞的胚胎發(fā)育時期是

桑葚胚期

桑葚胚期

，培養(yǎng)過程定期更換培養(yǎng)液的目的是

清除代謝產(chǎn)物，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害

清除代謝產(chǎn)物，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害

。
（4）根據(jù)實驗數(shù)據(jù)分析，亞麻酸溶液為200μmol?L^-1 時，對水牛卵母細胞體外成熟和囊胚發(fā)育起

促進

促進

作用。
（5）本實驗結(jié)果表明，

50

50

μmol?L^-1的亞麻酸對水牛卵母細胞體外成熟和囊胚發(fā)育都較有利，其判斷依據(jù)是

核成熟卵子數(shù)占卵母細胞的比例較高，囊胚數(shù)占培養(yǎng)卵數(shù)的比例較高

核成熟卵子數(shù)占卵母細胞的比例較高，囊胚數(shù)占培養(yǎng)卵數(shù)的比例較高

。