人乳鐵蛋白是一種重要的藥用保健蛋白，需經(jīng)過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體加工后才具備活性。如圖表示利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人乳鐵蛋白的部分過(guò)程，圖中Tet^r表示四環(huán)素抗性基因，Amp^r表示氨芐青霉素抗性基因，五種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如表所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：

限制酶	BamHⅠ	HaeⅢ	BclⅠ	Sau3AⅠ	NotⅠ
識(shí)別序列及切割位點(diǎn)	G↓GATCC CCTA↑GG	GG↓CC CC↑GG	T↓GATCA ACTAG↑T	↓GATC CTAG↑	GC↓GGCCGC CGCCGG↑CG

 （1）圖中質(zhì)粒上的Amp^r和Tet^r是

標(biāo)記基因

標(biāo)記基因

，作用是

篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞

篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞

。
（2）若選用牛作為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，可通過(guò)

顯微注射

顯微注射

方法將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵中，然后使其發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。
（3）據(jù)圖分析，篩選含有重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞首先需要在含

氨芐青霉素

氨芐青霉素

的培養(yǎng)基上進(jìn)行，能在該培養(yǎng)基生長(zhǎng)的受體細(xì)胞可能已經(jīng)導(dǎo)入重組質(zhì)粒。
（4）要將人乳鐵蛋白基因插入質(zhì)粒，若只允許使用一種限制酶，應(yīng)選擇的限制酶是

Sau3AⅠ

Sau3AⅠ

若BamHⅠ酶切的DNA末端與BclⅠ酶切的DNA末端連接起來(lái)，形成有6個(gè)堿基對(duì)序列的連接部位，對(duì)于該部位，這兩種酶

都不能

都不能

（填“都不能”或“只有一種能”）切開(kāi)。
（5）利用轉(zhuǎn)基因大腸桿菌（工程菌）不能生產(chǎn)有活性的人乳鐵蛋白，這是因?yàn)?

大腸桿菌為原核生物，無(wú)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不具備加工人乳鐵蛋白的能力

大腸桿菌為原核生物，無(wú)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不具備加工人乳鐵蛋白的能力

。