當(dāng)前位置： 2023-2024學(xué)年黑龍江省牡丹江二中高三（上）第一次段考生物試卷> 試題詳情

人乳鐵蛋白是一種重要的藥用保健蛋白，需經(jīng)過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體加工后才具備活性。如圖表示利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人乳鐵蛋白的部分過程，圖中Tet^r表示四環(huán)素抗性基因，Amp^r表示氨芐青霉素抗性基因，五種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如表所示?；卮鹣铝袉栴}：

限制酶 BamHⅠ HaeⅢ BclⅠ Sau3AⅠ NotⅠ

識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓GATCC
CCTA↑GG GG↓CC
CC↑GG T↓GATCA
ACTAG↑T ↓GATC
CTAG↑ GC↓GGCCGC
CGCCGG↑CG

（1）圖中質(zhì)粒上的Amp^r和Tet^r是
標(biāo)記基因
標(biāo)記基因
，作用是
篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞
篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞
。
（2）若選用牛作為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，可通過
顯微注射
顯微注射
方法將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵中，然后使其發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。
（3）據(jù)圖分析，篩選含有重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞首先需要在含
氨芐青霉素
氨芐青霉素
的培養(yǎng)基上進(jìn)行，能在該培養(yǎng)基生長的受體細(xì)胞可能已經(jīng)導(dǎo)入重組質(zhì)粒。
（4）要將人乳鐵蛋白基因插入質(zhì)粒，若只允許使用一種限制酶，應(yīng)選擇的限制酶是
Sau3AⅠ
Sau3AⅠ
若BamHⅠ酶切的DNA末端與BclⅠ酶切的DNA末端連接起來，形成有6個(gè)堿基對(duì)序列的連接部位，對(duì)于該部位，這兩種酶
都不能
都不能
（填“都不能”或“只有一種能”）切開。
（5）利用轉(zhuǎn)基因大腸桿菌（工程菌）不能生產(chǎn)有活性的人乳鐵蛋白，這是因?yàn)?
大腸桿菌為原核生物，無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不具備加工人乳鐵蛋白的能力
大腸桿菌為原核生物，無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不具備加工人乳鐵蛋白的能力
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．

【答案】標(biāo)記基因；篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞；顯微注射；氨芐青霉素；Sau3AⅠ；都不能；大腸桿菌為原核生物，無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不具備加工人乳鐵蛋白的能力

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/8/14 2:0:1組卷：5引用：2難度：0.6

相似題

1．胰蛋白酶抑制劑（TI）可抑制昆蟲蛋白酶活性，阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無細(xì)胞壁的單細(xì)胞真核綠藻，是能在高鹽條件下生長的新型生物反應(yīng)器。研究人員利用基因工程技術(shù)構(gòu)建TI基因的表達(dá)載體，并將其導(dǎo)入鹽藻細(xì)胞中，進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn)?；卮鹣铝袉栴}：
（1）研究人員利用PCR技術(shù)特異性地?cái)U(kuò)增目的基因的前提是需要

，以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關(guān)重要，將處理溫度控制在90～95℃，是為了

。
（2）獲取目的基因后，為了構(gòu)建基因表達(dá)載體，還需要使用的酶是

（答出2種）。構(gòu)建成功的基因表達(dá)載體應(yīng)含有的結(jié)構(gòu)有目的基因、啟動(dòng)子、

（答出3種）等結(jié)構(gòu)。
（3）研究人員將TI基因?qū)胧荏w細(xì)胞后進(jìn)行了檢測(cè)，相關(guān)步驟和實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表所示。該檢測(cè)方法依據(jù)的原理是

。據(jù)表分析，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明

。

組別實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)結(jié)果

① ② ③

轉(zhuǎn)基因鹽藻（A組）離心收集三組細(xì)
胞制備可溶性蛋
白質(zhì)樣品將TI注射到大白
兔體內(nèi)，獲取TI
抗體讓TI抗體和樣品
進(jìn)行混合檢測(cè) 有雜交帶

非轉(zhuǎn)基因鹽藻（B組）無雜交帶

陽性對(duì)照組（C組）有雜交帶

發(fā)布：2024/11/3 15:30:2組卷：5引用：4難度：0.7

解析

2．圖示PIJ702是一種常用質(zhì)粒，其中tar為硫鏈絲菌素（一種抗生素）抗性基因；mel為黑色素合成基因，其表達(dá)能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落；而三種限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識(shí)別序列?；卮鹣铝袉栴}。
表1

pU702pZHZ8

BglI5.7kb6.7kb

表2

固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度（ug/mL） 0 1 2 5 10

不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長狀況 +++++ +++ + - -

+表示生長；-表示不生長。
（1）限制性核酸內(nèi)切酶可以識(shí)別雙鏈DNA中特定核苷酸序列，并使每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的

斷裂，切割形成的末端有

兩種。
（2）以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因，與質(zhì)粒pIJ702上長度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進(jìn)行置換，構(gòu)建重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒經(jīng)限制酶BglⅡ酶切后所得片段長度見表1。由此判斷目的基因的片段長度為

kb,判定目的基因中含有一個(gè)BglⅡ切割位點(diǎn)的理由是

。
（3）導(dǎo)入目的基因時(shí)，首先用Ca²⁺處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細(xì)胞，再將重組質(zhì)粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下可以促進(jìn)鏈霉菌完成

過程。
（4）不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長狀況如表2所示。若要篩選導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌細(xì)胞，所需硫鏈絲菌素濃度至少應(yīng)在

μg/mL以上，挑選成功導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是

。若要檢測(cè)整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用，第一步需檢測(cè)受體細(xì)胞的

（填“DNA”或“RNA”），檢測(cè)方法應(yīng)采用

技術(shù)。

發(fā)布：2024/11/5 22:30:2組卷：21引用：3難度：0.6

解析

3．我國科學(xué)家利用蘇云金桿菌中的Bt基因培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，下列說法錯(cuò)誤的是（　?。?/h2>

A．科學(xué)家已對(duì)Bt基因的序列信息、表達(dá)產(chǎn)物等有了較為深入的了解

B．篩選Bt基因后可以利用PCR技術(shù)對(duì)其進(jìn)行大量的擴(kuò)增

C．培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的核心工作是將Bt基因?qū)朊藁?xì)胞中

D．檢查轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否培育成功首先要進(jìn)行分子水平的檢測(cè)

發(fā)布：2024/11/4 19:0:2組卷：1引用：1難度：0.7

解析

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限制酶	BamHⅠ	HaeⅢ	BclⅠ	Sau3AⅠ	NotⅠ
識(shí)別序列及切割位點(diǎn)	G↓GATCC CCTA↑GG	GG↓CC CC↑GG	T↓GATCA ACTAG↑T	↓GATC CTAG↑	GC↓GGCCGC CGCCGG↑CG

組別	實(shí)驗(yàn)步驟			實(shí)驗(yàn)結(jié)果
	①	②	③
轉(zhuǎn)基因鹽藻（A組）	離心收集三組細(xì) 胞制備可溶性蛋白質(zhì)樣品	將TI注射到大白兔體內(nèi)，獲取TI 抗體	讓TI抗體和樣品進(jìn)行混合檢測(cè)	有雜交帶
非轉(zhuǎn)基因鹽藻（B組）				無雜交帶
陽性對(duì)照組（C組）				有雜交帶

固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度（ug/mL）	0	1	2	5	10
不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長狀況	+++++	+++	+	-	-

3．我國科學(xué)家利用蘇云金桿菌中的Bt基因培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，下列說法錯(cuò)誤的是（ ?。?/h2>

3．我國科學(xué)家利用蘇云金桿菌中的Bt基因培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，下列說法錯(cuò)誤的是（　?。?/h2>