抗癌藥物紫杉醇是紅豆杉的次生代謝物,科研人員將其前體化合物紫杉二烯的合成酶基因(TS基因)導入煙草細胞,培育出可合成紫杉二烯的煙草植株,紫杉二烯通過化學方法較易合成紫杉醇。請回答下列問題:
(1)為了獲得TS基因,可采用的方法有PCR技術(shù)獲取和擴增、從基因文庫中獲取和
人工合成
人工合成
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(2)Ti質(zhì)粒上的啟動子是 RNA聚合酶
RNA聚合酶
識別和結(jié)合的部位,有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。除此之外,質(zhì)粒上還應有 標記基因、終止子、復制原點等
標記基因、終止子、復制原點等
(至少寫出2種)。
(3)構(gòu)建重組質(zhì)粒時,對TS基因和質(zhì)粒進行雙酶切的優(yōu)點是 避免質(zhì)粒或目的基因自身環(huán)化;確保連接方向的正確性
避免質(zhì)?;蚰康幕蜃陨憝h(huán)化;確保連接方向的正確性
(寫出一點)。注意TS基因必須要插入Ti質(zhì)粒的 T-DNA
T-DNA
上。
(4)在轉(zhuǎn)化篩選時,圖示采用了 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化
法將TS基因?qū)霟煵菁毎?。過程①中應在培養(yǎng)基中加入 卡那霉素
卡那霉素
進行篩選。
(5)與紅豆杉相比,煙草生長周期大幅縮短,但仍需要數(shù)月時間,請簡要設計一種更為快速生產(chǎn)紫杉二烯的生物學方法 取轉(zhuǎn)基因煙草組織細胞進行植物細胞培養(yǎng)(細胞產(chǎn)物工廠化)、構(gòu)建合成紫杉二烯的轉(zhuǎn)基因微生物等
取轉(zhuǎn)基因煙草組織細胞進行植物細胞培養(yǎng)(細胞產(chǎn)物工廠化)、構(gòu)建合成紫杉二烯的轉(zhuǎn)基因微生物等
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