基因工程的相關(guān)技術(shù)可用于病毒檢測，也可用于制備疫苗。利用熒光PCR技術(shù)檢測是否感染某種RNA病毒時，基本操作流程為：提取病毒的RNA→熒光PCR擴增反轉(zhuǎn)錄DNA→熒光檢測。請回答下列問題：
（1）分離病毒的RNA通常在冰浴條件下進行，目的是抑制RNA酶RNA酶的活性，防止病毒的RNA降解。熒光PCR反應體系中需要加入的酶和原料是反轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶和4種脫氧核苷酸反轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶和4種脫氧核苷酸。為保證反應體系只擴增病毒特異性核酸序列，應先根據(jù)病毒的特異性核酸序列設(shè)計2種引物2種引物。
（2）熒光染料能摻入DNA雙鏈中發(fā)出熒光，在游離狀態(tài)下不發(fā)出熒光。若檢測到熒光量達到某個臨界值，則代表陽性，說明樣本中含有病毒的RNA樣本中含有病毒的RNA。若檢測出現(xiàn)“假陰性”現(xiàn)象，原因可能是病毒的RNA在提取過程中發(fā)生降解病毒的RNA在提取過程中發(fā)生降解。
（3）某病毒的E蛋白和P蛋白會引起機體產(chǎn)生特異性免疫反應。構(gòu)建重組活病毒載體疫苗時，獲取某病毒的E基因和P基因E基因和P基因插入腺病毒的基因組中。通過重組腺病毒感染動物可使其獲得免疫力，原因是重組腺病毒在動物體內(nèi)表達E蛋白和P蛋白，刺激動物產(chǎn)生特異性抗體和記憶細胞重組腺病毒在動物體內(nèi)表達E蛋白和P蛋白，刺激動物產(chǎn)生特異性抗體和記憶細胞。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】RNA酶；反轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶和4種脫氧核苷酸；2種引物；樣本中含有病毒的RNA；病毒的RNA在提取過程中發(fā)生降解；E基因和P基因；重組腺病毒在動物體內(nèi)表達E蛋白和P蛋白，刺激動物產(chǎn)生特異性抗體和記憶細胞
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：22引用：2難度：0.7
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．PCR技術(shù)不僅可以擴增目的基因，還可用于定點誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進行兩次PCR，其操作步驟為：
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計引物，得到兩個常規(guī)引物，分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物；
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計突變上游引物，突變位點位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進行第一次PCR反應得到下游大引物；
④用得到的下游大引物中和另一個常規(guī)上游引物進行第二次PCR擴增，得到突變目的基因序列?；卮鹣铝袉栴}：
（1）PCR擴增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān)，DNA中G+C的含量越多，要求的變性溫度越高。其原因是。該PCR擴增技術(shù)所需的基本條件是種引物、原料、模板、。
（2）在第一次PCR反應中，形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過次復制。第一次PCR的產(chǎn)物DNA的條鏈作為第二次PCR所用的引物。與X射線誘變相比，該突變技術(shù)的優(yōu)點是。
（3）如果要利用微生物進一步克隆PCR定點誘變產(chǎn)物，其步驟包括：、、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取更多目的基因。將獲取目的基因和質(zhì)粒進行連接后，需先用處理農(nóng)桿菌以便將基因表達載體導入馬鈴薯細胞，將馬鈴薯細胞培養(yǎng)成幼苗時經(jīng)過的兩個過程是。檢測目的基因是否在馬鈴薯細胞中轉(zhuǎn)錄出了mRNA，所采用的方法是。發(fā)布：2024/12/30 23:0:2組卷：32引用：3難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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