為了提高菊花抗凍能力,研究者從其他生物中克隆出抗凍基因C(圖1),擬將其與質(zhì)粒(圖2)重組,再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中。
回答下列問題:
(1)構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)需要用到的工具酶為 限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶(限制酶和DNA連接酶)限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶(限制酶和DNA連接酶)。為使抗凍基因C在菊花細(xì)胞中高效表達(dá),依據(jù)圖2需要把目的基因片段插入表達(dá)載體的 啟動(dòng)子a啟動(dòng)子a和 終止子a終止子a之間。
(2)若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá),需要通過質(zhì)粒作為載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,原因是 目的基因無(wú)復(fù)制原點(diǎn)(目的基因無(wú)表達(dá)所需的啟動(dòng)子等)目的基因無(wú)復(fù)制原點(diǎn)(目的基因無(wú)表達(dá)所需的啟動(dòng)子等)(答出一點(diǎn)即可)。若想了解抗凍基因C是否整合到菊花染色體上,檢測(cè)方法是采用 DNA分子雜交DNA分子雜交技術(shù)。
(3)科研工作者可以利用 PCR技術(shù)PCR技術(shù)獲得更多的抗凍基因C,借助農(nóng)桿菌將重組質(zhì)粒導(dǎo)入菊花細(xì)胞,在該過程中需添加酚類物質(zhì),目的是 吸引農(nóng)桿菌感染菊花細(xì)胞吸引農(nóng)桿菌感染菊花細(xì)胞。
(4)若想獲得完整的轉(zhuǎn)基因植株。還需借助 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)技術(shù)。假如獲得的轉(zhuǎn)基因植株(抗凍基因C已經(jīng)整合到菊花的基因組中)抗凍能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是 目的基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯異常目的基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯異常。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶(限制酶和DNA連接酶);啟動(dòng)子a;終止子a;目的基因無(wú)復(fù)制原點(diǎn)(目的基因無(wú)表達(dá)所需的啟動(dòng)子等);DNA分子雜交;PCR技術(shù);吸引農(nóng)桿菌感染菊花細(xì)胞;植物組織培養(yǎng);目的基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯異常
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:48引用:4難度:0.6
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