R-7是家蠶體內(nèi)的一種小分子非編碼RNA，可與某些mRNA尾端的一段非編碼序列（3′-UTR）結(jié)合，進(jìn)而影響基因的表達(dá)。為研究R-7是否影響家蠶基因B（調(diào)控家蠶眼睛發(fā)育）的表達(dá)，科研人員將基因B中對(duì)應(yīng)3′-UTR的DNA片段與熒光素酶基因（該基因的表達(dá)不受R-7的影響）重組如甲圖所示，將該重組載體導(dǎo)入家蠶胚胎細(xì)胞并觀察其表達(dá)，結(jié)果如乙圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）要想短時(shí)間內(nèi)獲得大量目的基因需用到的技術(shù)是

PCR

PCR

，該技術(shù)的原理是

該基因的一段核苷酸序列

該基因的一段核苷酸序列

。若一個(gè)含目的基因的DNA擴(kuò)增n代，則共需消耗

2ⁿ-1

2ⁿ-1

對(duì)引物。
（2）圖甲中對(duì)應(yīng)3'-UTR的DNA片段應(yīng)插入到位點(diǎn)

2

2

，原因是

目的基因應(yīng)插入到啟動(dòng)子與終止子之間，且不能破壞熒光素酶基因

目的基因應(yīng)插入到啟動(dòng)子與終止子之間，且不能破壞熒光素酶基因

?；蚬こ痰暮诵牟襟E是

基因表達(dá)載體的構(gòu)建

基因表達(dá)載體的構(gòu)建

，其目的是

使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并可以遺傳給下一代，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用

使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并可以遺傳給下一代，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用

。
（3）科研人員從乙圖所示的實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組細(xì)胞中提取蛋白質(zhì)，經(jīng)處理檢測(cè)后獲得相對(duì)熒光值（在適宜條件下，熒光素酶可催化熒光素發(fā)生氧化反應(yīng)并發(fā)出熒光）。實(shí)驗(yàn)組為將重組載體導(dǎo)入含R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中，對(duì)照組1為將含有熒光素酶基因的表達(dá)載體（不含對(duì)應(yīng)3′-UTR的DNA片段）導(dǎo)入含R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中，則對(duì)照組2應(yīng)為

將重組載體導(dǎo)入不含（或去除）R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中

將重組載體導(dǎo)入不含（或去除）R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中

。由結(jié)果推知R-7通過(guò)

與基因B所轉(zhuǎn)錄的mRNA的3'-UTR結(jié)合

與基因B所轉(zhuǎn)錄的mRNA的3'-UTR結(jié)合

進(jìn)而抑制基因B的表達(dá)。