含有限制酶的細(xì)胞中通常還具有相應(yīng)的甲基化酶,這兩種酶對DNA分子有相同的作用序列,但具有不同的催化功能。甲基化酶可以對DNA序列進(jìn)行修飾,使限制酶不能對這一序列進(jìn)行識(shí)別和切割?;卮鹣铝袉栴}:
(1)目前,基因工程中使用的限制酶主要是從原核原核生物中分離純化獲得的。構(gòu)建“基因組文庫”和“cDNA文庫”的過程中需要使用DNA連接酶的是基因組文庫和cDNA文庫基因組文庫和cDNA文庫(填“基因組文庫”“cDNA文庫”或“基因組文庫和cDNA文庫”)。
(2)含有某種限制酶的細(xì)胞,可以利用限制酶切割外源DNA,但不破壞細(xì)胞自身的DNA,其原因可能有①細(xì)胞自身的DNA分子沒有該限制酶的識(shí)別序列細(xì)胞自身的DNA分子沒有該限制酶的識(shí)別序列;②甲基化酶對細(xì)胞自身的DNA分子進(jìn)行了修飾甲基化酶對細(xì)胞自身的DNA分子進(jìn)行了修飾。
(3)利用PCR擴(kuò)增目的基因的過程由高溫變性(90~95℃)、低溫復(fù)性(55~60℃)、適溫延伸(70-75℃)三個(gè)步驟構(gòu)成一個(gè)循環(huán),為使得DNA聚合酶能夠重復(fù)利用,選用的酶應(yīng)在90-9590-95℃處理后仍然 具備催化活性。
(4)在PCR擴(kuò)增目的基因時(shí),為實(shí)現(xiàn)序列中的腺嘌呤被放射性同位素標(biāo)記,反應(yīng)體系中添加的原料應(yīng)包括堿基已被標(biāo)記的dATPdATP (填“腺嘌呤核糖核苷酸”、“dATP”或“ATP”)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】原核;基因組文庫和cDNA文庫;細(xì)胞自身的DNA分子沒有該限制酶的識(shí)別序列;甲基化酶對細(xì)胞自身的DNA分子進(jìn)行了修飾;90-95;dATP
【解答】
【點(diǎn)評】
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