異丁醇具有燃值高、能量密度高等優(yōu)點，其開發(fā)和利用對優(yōu)化我國能源結構和保護環(huán)境有非常重要的戰(zhàn)略意義。基于釀酒酵母的發(fā)酵途徑（圖甲）和圖乙的質粒，研究者構建了一種表達載體pUC18，用于過表達ILV2、ILV5、ILV3、AR010基因，以實現(xiàn)異丁醇的大規(guī)模生產(chǎn)。已知氨芐青霉素能抑制細菌細胞壁的形成。據(jù)此回答下列問題：
（1）圖乙質粒上有多個限制酶切位點，作用是 便于插入多種外源基因便于插入多種外源基因。研究人員先用pUC18轉化經(jīng) Ca2+處理Ca2+處理（處理方法）的大腸桿菌，以便篩選、鑒定擴增重組質粒。重組質粒上有 原核生物的復制原點原核生物的復制原點，所以能在大腸桿菌中擴增。
（2）將環(huán)狀載體pUC18導入釀酒酵母時，一般會將其進行酶切得到線性化載體，隨后再將其導入受體細胞。根據(jù)所學的知識推測酶切得到線性化載體的目的是 線性化載體能整合到釀酒酵母染色體DNA，從而能更穩(wěn)定存在并發(fā)揮功能線性化載體能整合到釀酒酵母染色體DNA，從而能更穩(wěn)定存在并發(fā)揮功能。
（3）提取成功構建的表達載體并導入不能合成組氨酸的釀酒酵母菌株，將菌株接種在培養(yǎng)基中以獲得單菌落，該過程稱為微生物的 選擇選擇培養(yǎng)。培養(yǎng)基中需要添加的物質有 cc。
（用下列字母填寫：a.組氨酸、b.氨芐青霉素、c瓊脂）。
（4）異丁醇的大量積累會傷害細胞，研究人員給該工程菌導入一個經(jīng)改造的光敏蛋白基因，使工程菌對特定的藍光敏感。進行不同的光照處理，使其在異丁酵產(chǎn)生階段和生長繁殖階段進行切換，結果如下圖丙所示。
注：5/10/20h pulse分別代表在黑暗條件下每隔5、10、20h發(fā)出15s和65s的藍光脈沖30min
①對照組的酵母菌需要導入 不含光敏蛋白基因的空載體不含光敏蛋白基因的空載體。
②以葡萄糖為碳源，利用該轉基因釀酒酵母進行發(fā)酵時，若想進一步提高其異丁醇產(chǎn)量，
綜合圖甲和圖乙信息，分別寫出進一步優(yōu)化菌株和工藝的措施（各一點） 敲除該工程菌的ADHs和ALDs基因，在黑暗條件下每隔10h發(fā)出15s和65s的藍光脈沖30min敲除該工程菌的ADHs和ALDs基因，在黑暗條件下每隔10h發(fā)出15s和65s的藍光脈沖30min。
【答案】便于插入多種外源基因；Ca2+處理；原核生物的復制原點；線性化載體能整合到釀酒酵母染色體DNA，從而能更穩(wěn)定存在并發(fā)揮功能；選擇；c；不含光敏蛋白基因的空載體；敲除該工程菌的ADHs和ALDs基因，在黑暗條件下每隔10h發(fā)出15s和65s的藍光脈沖30min
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：10引用：1難度：0.6
相似題
-
1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6