目前采用RT-PCR技術(shù)(逆轉(zhuǎn)錄熒光PCR技術(shù))進(jìn)行新冠毒核酸檢測,操作流程:從密接者組織中提取RNA→將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA→PCR擴(kuò)增cDNA→DNA分子雜交進(jìn)行核酸檢測→通過熒光強(qiáng)度判斷是否含有病毒核酸?!昂怂釞z測試劑盒實際上是盛放有幾種關(guān)鍵試劑的盒子,比如:特異性的熒光DNA探針(特異性的帶熒光的病毒核酸序列)逆轉(zhuǎn)錄酶、PCR相關(guān)試劑等。
(1)PCR相關(guān)試劑指四種游離的脫氧核苷酸、引物引物和 熱穩(wěn)定DNA聚合酶熱穩(wěn)定DNA聚合酶。
(2)DNA分子雜交指用 特異性的熒光DNA探針特異性的熒光DNA探針與擴(kuò)增的cDNA進(jìn)行雜交,若雜交成功,體系中的熒光信號就會增強(qiáng)。
(3)若熒光DNA探針的序列特異性不強(qiáng),可能會出現(xiàn)“假陽性”(非感染者也能檢測到一定的熒光強(qiáng)度),原因是 DNA探針序列特異性不強(qiáng)可能導(dǎo)致該探針和其它cDNA雜交配對,從而使體系的熒光信號也增強(qiáng)DNA探針序列特異性不強(qiáng)可能導(dǎo)致該探針和其它cDNA雜交配對,從而使體系的熒光信號也增強(qiáng)。
(4)若能提取到新冠病毒蛋白外殼,也可以用 抗原抗體雜交抗原抗體雜交方法進(jìn)行檢測。提取出的蛋白質(zhì)外殼還可以用于 制作新冠病毒疫苗制作新冠病毒疫苗。
【答案】引物;熱穩(wěn)定DNA聚合酶;特異性的熒光DNA探針;DNA探針序列特異性不強(qiáng)可能導(dǎo)致該探針和其它cDNA雜交配對,從而使體系的熒光信號也增強(qiáng);抗原抗體雜交;制作新冠病毒疫苗
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:4引用:1難度:0.6
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1.數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù),其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6 -
2.PCR技術(shù)不僅可以擴(kuò)增目的基因,還可用于定點誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進(jìn)行兩次PCR,其操作步驟為:
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計引物,得到兩個常規(guī)引物,分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物;
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計突變上游引物,突變位點位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進(jìn)行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物;
④用得到的下游大引物中和另一個常規(guī)上游引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增,得到突變目的基因序列?;卮鹣铝袉栴}:
(1)PCR擴(kuò)增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān),DNA中G+C的含量越多,要求的變性溫度越高。其原因是
(2)在第一次PCR反應(yīng)中,形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過
(3)如果要利用微生物進(jìn)一步克隆PCR定點誘變產(chǎn)物,其步驟包括:發(fā)布:2024/12/30 23:0:2組卷:32引用:3難度:0.6 -
3.下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯誤的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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