人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細胞分泌的一種糖蛋白。如圖是制備抗HCG單克隆抗體流程示意圖,回答下列問題:
(1)制備單克隆抗體過程中要用到 動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)技術(shù)。制備單克隆抗體過程中,給小鼠注射的HCG相當于 抗原抗原,使小鼠產(chǎn)生能分泌相應(yīng)抗體的漿細胞。
(2)步驟③需對選擇培養(yǎng)的雜交瘤細胞進行 克隆化培養(yǎng)及抗體檢測克隆化培養(yǎng)及抗體檢測,該過程一般在多孔細胞培養(yǎng)板上進行。先將細胞懸浮液稀釋到710個細胞/mL,再在每個培養(yǎng)孔中滴入0.1mL細胞稀釋液,其目的是 使每個孔內(nèi)不多于一個細胞,達到單克隆培養(yǎng)的目的使每個孔內(nèi)不多于一個細胞,達到單克隆培養(yǎng)的目的。
(3)在細胞內(nèi)DNA合成一般有兩條途徑。主要途徑是在細胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸,進而合成DNA,而氨基蝶呤可以阻斷此途徑。另一輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下,經(jīng)酶催化合成DNA,而骨髓瘤細胞的DNA合成沒有此輔助途徑。根據(jù)此原理,向經(jīng)誘導后的漿細胞與骨髓瘤細胞混合培養(yǎng)液中添加氨基蝶呤 能能(填“能”或“不能”)能篩選雜交瘤細胞,原因是 漿細胞不能增殖,骨髓瘤細胞中的DNA合成途徑被阻斷不能增殖,雜交瘤細胞可通過輔助途徑合成DNA,能夠增殖漿細胞不能增殖,骨髓瘤細胞中的DNA合成途徑被阻斷不能增殖,雜交瘤細胞可通過輔助途徑合成DNA,能夠增殖。
(4)用抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體做成的“早早孕診斷試劑盒”,在妊娠第8天就可以做出診斷,而且檢測的準確率在90%以上,主要是因為該抗體具有 特異性強特異性強和 靈敏度高靈敏度高的優(yōu)點。
【考點】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng);抗原;克隆化培養(yǎng)及抗體檢測;使每個孔內(nèi)不多于一個細胞,達到單克隆培養(yǎng)的目的;能;漿細胞不能增殖,骨髓瘤細胞中的DNA合成途徑被阻斷不能增殖,雜交瘤細胞可通過輔助途徑合成DNA,能夠增殖;特異性強;靈敏度高
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:14引用:3難度:0.7
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(1)檢測發(fā)現(xiàn)細胞的CLDN6蛋白能夠促進腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點。CLDN6蛋白是一個跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時,應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達CLDN6細胞和低表達CLDN6細胞,檢測細胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
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發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5
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