中國(guó)科學(xué)家運(yùn)用合成生物學(xué)方法構(gòu)建了一株嗜鹽單胞菌H,以糖蜜(甘蔗榨糖后的廢棄液,含較多蔗糖)為原料,在實(shí)驗(yàn)室發(fā)酵生產(chǎn)PHA等新型高附加值可降解材料,期望提高甘蔗的整體利用價(jià)值。工藝流程如圖?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)為提高菌株H對(duì)蔗糖的耐受能力和利用效率,可在液體培養(yǎng)基中將蔗糖作為
唯一碳源
唯一碳源
,并不斷提高其濃度,經(jīng)多次傳代培養(yǎng)以獲得目標(biāo)菌株。培養(yǎng)過(guò)程中定期取樣并用 稀釋涂布平板法
稀釋涂布平板法
的方法進(jìn)行菌落計(jì)數(shù),評(píng)估菌株增殖狀況。
(2)培養(yǎng)嗜鹽單胞菌H時(shí)配制的培養(yǎng)基必須進(jìn)行 高壓蒸汽
高壓蒸汽
滅菌處理,目的是 防止雜菌污染對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾
防止雜菌污染對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾
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(3)檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌效果的常用方法是 滅菌完成的空白培養(yǎng)基在適宜條件下培養(yǎng)一天,看是否有菌落生成
滅菌完成的空白培養(yǎng)基在適宜條件下培養(yǎng)一天,看是否有菌落生成
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(4)基于菌株H嗜鹽、酸堿耐受能力強(qiáng)等特性,研究人員設(shè)計(jì)了一種不需要滅菌的發(fā)酵系統(tǒng),其培養(yǎng)基鹽濃度設(shè)為60g/L,pH為10,菌株H可正常持續(xù)發(fā)酵60d以上。該系統(tǒng)不需要滅菌的原因是 高鹽環(huán)境導(dǎo)致其他雜菌失水過(guò)多而死亡;較高的pH導(dǎo)致其他雜菌的酶變性失活,生長(zhǎng)繁殖受抑制
高鹽環(huán)境導(dǎo)致其他雜菌失水過(guò)多而死亡;較高的pH導(dǎo)致其他雜菌的酶變性失活,生長(zhǎng)繁殖受抑制
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