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CRISPP/Ces9是一種高效的基因編輯技術(shù),通過切割DNA雙鏈以敲除目標基因或插入新的基因。科學(xué)家構(gòu)建了如圖所示的兩種質(zhì)粒,并包埋于脂質(zhì)體中,然后將脂質(zhì)體加入含受體細胞的培養(yǎng)皿中,實現(xiàn)了基因轉(zhuǎn)移。回答下列問題:
菁優(yōu)網(wǎng)
(1)研究發(fā)現(xiàn)CRISPR-Cas9系統(tǒng)廣泛存在于細菌細胞內(nèi),推測該系統(tǒng)在細菌細胞內(nèi)的作用是
切割外源DNA,保護自身
切割外源DNA,保護自身
。CRISPR-Cas系統(tǒng)中 Cas9蛋白具有內(nèi)切酶活性,水解目標DNA的
磷酸二酯鍵
磷酸二酯鍵
(填化學(xué)鍵)。
(2)實驗中利用脂質(zhì)體能實現(xiàn)基因轉(zhuǎn)移的原理
生物膜具有一定的流動性
生物膜具有一定的流動性
。24 h后在培養(yǎng)皿中添加
抗生素G418和嘌呤霉素
抗生素G418和嘌呤霉素
篩選并進行單細胞培養(yǎng),經(jīng)檢測后即可得到基因編輯后的細胞。此過程須在37℃,氣體環(huán)境為95%空氣+5% CO2的裝置中進行。
(3)轉(zhuǎn)染好的細胞用裂解液消化后,使用RNA提取試劑盒提取總RNA,使用反轉(zhuǎn)試劑盒選行逆轉(zhuǎn)錄,最終得到
cDNA
cDNA
,再進行PCR。進行PCR時,a個雙鏈DNA經(jīng)過n輪擴增,理論上至少需要的引物數(shù)量為
(2n+1-2)a
(2n+1-2)a
。

【答案】切割外源DNA,保護自身;磷酸二酯鍵;生物膜具有一定的流動性;抗生素G418和嘌呤霉素;cDNA;(2n+1-2)a
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:29引用:2難度:0.7
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    發(fā)布:2024/12/18 14:0:2組卷:29引用:5難度:0.7
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