如果已知一小段DNA的序列,可采用PCR的方法,簡捷地分析出已知序列兩側(cè)的序列,具體流程如圖(以EcoRⅠ酶切為例):
請據(jù)圖回答問題:
(1)步驟Ⅰ用的EcoRⅠ是一種限制性核酸內(nèi)切(或限制)限制性核酸內(nèi)切(或限制)酶,它通過識別特定的核苷酸序列核苷酸序列切割特定位點(diǎn)。
(2)步驟Ⅱ用的DNA連接酶催化相鄰核苷酸之間的3′-羥基與5′-磷酸間形成磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵;PCR循環(huán)中,升溫到95℃是為了獲得DNA單鏈DNA單鏈;Taq DNA聚合酶的作用是催化以DNA為模板的DNA鏈的延伸以DNA為模板的DNA鏈的延伸。
(3)若下表所列為已知的DNA序列和設(shè)計(jì)的一些PCR引物,步驟Ⅲ選用的PCR引物必須是②④②④(從引物①②③④中選擇,填編號)。
DNA序列(虛線處省略了部分核苷酸序列) | |
已知序列 | |
PCR引物 | ①5′-AACTATGCGCTCATGA-3′ ②5′-GCAATGCGTAGCCTCT-3′ ③5′-AGAGGCTACGCATTGC-3′ ④5′-TCATGAGCGCATAGTT-3′ |
B
B
。A.5′-AACTATGCG----------AGCCCTT-3′
B.5′-AATTCCATG----------CTGAATT-3′
C.5′-GCAATGCGT----------TCGGGAA-3′
D.5′-TTGATACGC----------CGAGTAC-3′
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】限制性核酸內(nèi)切(或限制);核苷酸序列;磷酸二酯鍵;DNA單鏈;以DNA為模板的DNA鏈的延伸;②④;B
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:448引用:3難度:0.5
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