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菁優(yōu)網(wǎng)根癌農(nóng)桿菌及其質(zhì)粒是一種天然的植物外源基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)。實(shí)驗小組利用根癌農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒系統(tǒng)將抗菌肽基因?qū)攵i稻細(xì)胞內(nèi),獲得了具有廣泛抗菌效應(yīng)的水稻?;卮鹣铝袉栴}:
(1)轉(zhuǎn)化是基因工程中的一個重要環(huán)節(jié),轉(zhuǎn)化是指目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)
維持穩(wěn)定和表達(dá)
維持穩(wěn)定和表達(dá)
的過程。實(shí)驗小組在進(jìn)行含重組質(zhì)粒的根癌農(nóng)桿菌和秈稻組織細(xì)胞共培養(yǎng)前,受體細(xì)胞要沾蘸少量酚類化合物。沾蘸酚類化合物的作用是
吸引根癌農(nóng)桿菌向受體細(xì)胞移動
吸引根癌農(nóng)桿菌向受體細(xì)胞移動
。檢測抗菌肽基因是否插入到受體細(xì)胞的DNA上,可采用
DNA分子雜交
DNA分子雜交
技術(shù)進(jìn)行檢測。
(2)如圖表示經(jīng)人工修飾后的Ti質(zhì)粒。
①在構(gòu)建的重組Ti質(zhì)粒中,啟動子應(yīng)該位于抗菌肽基因的
上游
上游
(填“上游”或“下游”)。
②構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時,要將抗菌肽基因?qū)氲絋-DNA內(nèi)部,原因是
T-DNA能攜帶目的基因轉(zhuǎn)移并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上
T-DNA能攜帶目的基因轉(zhuǎn)移并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上
。篩選重組質(zhì)粒時,需要在培養(yǎng)基中加入
新霉素
新霉素
。在該培養(yǎng)基上能增殖的細(xì)胞不能完全保證成功導(dǎo)入了抗菌肽基因,原因可能是
導(dǎo)入了不含抗菌肽基因的空白載體
導(dǎo)入了不含抗菌肽基因的空白載體
,因此需要進(jìn)一步篩選和鑒定。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】維持穩(wěn)定和表達(dá);吸引根癌農(nóng)桿菌向受體細(xì)胞移動;DNA分子雜交;上游;T-DNA能攜帶目的基因轉(zhuǎn)移并整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上;新霉素;導(dǎo)入了不含抗菌肽基因的空白載體
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:9引用:2難度:0.7
相似題
  • 1.基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速,如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是(  )
    菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/11/14 7:0:1組卷:62引用:7難度:0.7
  • 2.經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng),嚴(yán)重時甚至危及生命,因此必須對食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來源的多銅氧化酶(MCO)能高效分解生物胺,基于基因工程規(guī)模化生產(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因,然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá)。
    (1)通過上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物,涉及如下步驟,則合理的操作步驟排序是
     
    (填寫下列編號)。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?;a(chǎn)目標(biāo)蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
    ⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
    (2)在PCR過程中,引物的功能是
     

    A.啟動DNA復(fù)制
    B.規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
    C.解旋DNA雙鏈
    D.充當(dāng)復(fù)制模板
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    (3)為獲得目的基因MCO(圖甲灰色表示的序列),正確設(shè)計的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    (4)獲取目的基因后,需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    (填DNA或RNA/DNA或RNA)。
    (5)在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中,溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     

    (6)若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端,那么載體質(zhì)粒pCLY15(圖丙中圖1)需用
     
     
    切開,才能與MCO片段高效連接。
    (7)下列實(shí)驗操作中,能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     

    A.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,用合適的限制酶切割
    B.在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑,以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
    C.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,以此為模板進(jìn)行PCR檢測
    D.將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc(四環(huán)素)的平板上,根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布:2024/11/14 4:30:2組卷:29引用:3難度:0.5
  • 3.用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒,可產(chǎn)生14kb(1kb即1000個堿基對)的長鏈,而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒,可得到三種長度的DNA片段,見圖(其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端)。
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    若用MboⅠ限制酶單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒,則產(chǎn)生的DNA片段的長度為( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/14 4:0:2組卷:89引用:9難度:0.7
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