犬細(xì)小病毒（CPV）主要感染幼犬，傳染性極強，死亡率也高。利用小鼠制備抗CPV單克隆抗體的基本流程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

（1）制備單克隆抗體依賴的生物技術(shù)有

動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞融合

動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞融合

（答出2點）。步驟①中，用滅活的CPV免疫小鼠需要在一定時間內(nèi)間隔注射3次，其目的是

加強免疫，刺激小鼠機體產(chǎn)生更多已免疫的B淋巴細(xì)胞

加強免疫，刺激小鼠機體產(chǎn)生更多已免疫的B淋巴細(xì)胞

。
（2）促進(jìn)兩種細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)劑是

聚乙二醇（PEG）或滅活病毒

聚乙二醇（PEG）或滅活病毒

，經(jīng)過步驟②后獲得的是多種類型的雜交細(xì)胞，原因是

細(xì)胞融合是隨機的

細(xì)胞融合是隨機的

。對雜交細(xì)胞等用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選得到雜交瘤細(xì)胞，對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行

克隆化培養(yǎng)、抗體檢測

克隆化培養(yǎng)、抗體檢測

，經(jīng)過多次篩選才能獲得足夠數(shù)量的能分泌抗CPV抗體的細(xì)胞。
（3）體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞后從培養(yǎng)液中提取到抗CPV單克隆抗體。雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)液中有各種營養(yǎng)物質(zhì)，還需要添加

血清和抗生素

血清和抗生素

以補充細(xì)胞生長所需的未知營養(yǎng)物質(zhì)和防止雜菌污染。
（4）對疑似感染CPV的幼犬進(jìn)行確診時，可用獲得的抗CPV單克隆抗體進(jìn)行

抗原—抗體雜交

抗原—抗體雜交

檢測。