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R-7是家蠶體內(nèi)的一種小分子非編碼RNA,可與某些mRNA尾端的一段非編碼序列(3'-UTR)結(jié)合,進(jìn)而影響基因的表達(dá)。為研究R-7是否影響家蠶基因B(調(diào)控家蠶眼睛發(fā)育)的表達(dá),科研人員將基因B中對(duì)應(yīng)3'-UTR的DNA片段與熒光素酶基因(R-7不影響熒光素酶基因的表達(dá))重組,如圖1所示。將該重組載體導(dǎo)入家蠶胚胎細(xì)胞并檢測(cè)其表達(dá)情況,結(jié)果如圖2所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
菁優(yōu)網(wǎng)
(1)要想短時(shí)間內(nèi)獲得大量目的基因,需要用到的技術(shù)是
PCR擴(kuò)增技術(shù)
PCR擴(kuò)增技術(shù)
,該技術(shù)的原理是
DNA復(fù)制
DNA復(fù)制
。
(2)圖1中對(duì)應(yīng)3'-UTR的DNA片段應(yīng)插入到位點(diǎn)
2
2
,原因是
目的基因應(yīng)插入到啟動(dòng)子與終止子之間,且不能破壞熒光素酶基因
目的基因應(yīng)插入到啟動(dòng)子與終止子之間,且不能破壞熒光素酶基因
?;蚬こ痰暮诵牟襟E是
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
基因表達(dá)載體的構(gòu)建

(3)科研人員從圖②所示的實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組細(xì)胞中提取蛋白質(zhì),經(jīng)處理檢測(cè)后獲得相對(duì)熒光值(在適宜條件下,熒光素酶可催化熒光素發(fā)生氧化反應(yīng)并發(fā)出熒光)。實(shí)驗(yàn)組為將重組載體導(dǎo)入含R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中,對(duì)照組1為將含有熒光素酶基因的表達(dá)載體(不含對(duì)應(yīng)3'-UTR的DNA片段)導(dǎo)入含R一7的家蠶胚胎細(xì)胞中,則對(duì)照組2應(yīng)為
將重組載體導(dǎo)入不含(或去除)R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中
將重組載體導(dǎo)入不含(或去除)R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中
。由結(jié)果推知R-7通過(guò)
與基因B所轉(zhuǎn)錄的mRNA的3'-UTR結(jié)合
與基因B所轉(zhuǎn)錄的mRNA的3'-UTR結(jié)合
進(jìn)而抑制基因B的表達(dá)。

【答案】PCR擴(kuò)增技術(shù);DNA復(fù)制;2;目的基因應(yīng)插入到啟動(dòng)子與終止子之間,且不能破壞熒光素酶基因;基因表達(dá)載體的構(gòu)建;將重組載體導(dǎo)入不含(或去除)R-7的家蠶胚胎細(xì)胞中;與基因B所轉(zhuǎn)錄的mRNA的3'-UTR結(jié)合
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書(shū)面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:3引用:3難度:0.7
相似題
  • 菁優(yōu)網(wǎng)1.圖示PIJ702是一種常用質(zhì)粒,其中tar為硫鏈絲菌素(一種抗生素)抗性基因;mel為黑色素合成基因,其表達(dá)能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落;而三種限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識(shí)別序列。回答下列問(wèn)題。
    表1
    pU702pZHZ8
    BglI5.7kb6.7kb
    表2
    固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度(ug/mL) 0 1 2 5 10
    不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長(zhǎng)狀況 +++++ +++ + - -
    +表示生長(zhǎng);-表示不生長(zhǎng)。
    (1)限制性核酸內(nèi)切酶可以識(shí)別雙鏈DNA中特定核苷酸序列,并使每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的
     
    斷裂,切割形成的末端有
     
    兩種。
    (2)以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因,與質(zhì)粒pIJ702上長(zhǎng)度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進(jìn)行置換,構(gòu)建重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒經(jīng)限制酶BglⅡ酶切后所得片段長(zhǎng)度見(jiàn)表1。由此判斷目的基因的片段長(zhǎng)度為
     
    kb,判定目的基因中含有一個(gè)BglⅡ切割位點(diǎn)的理由是
     

    (3)導(dǎo)入目的基因時(shí),首先用Ca2+處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細(xì)胞,再將重組質(zhì)粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下可以促進(jìn)鏈霉菌完成
     
    過(guò)程。
    (4)不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)狀況如表2所示。若要篩選導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌細(xì)胞,所需硫鏈絲菌素濃度至少應(yīng)在
     
    μg/mL以上,挑選成功導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是
     
    。若要檢測(cè)整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用,第一步需檢測(cè)受體細(xì)胞的
     
    (填“DNA”或“RNA”),檢測(cè)方法應(yīng)采用
     
    技術(shù)。

    發(fā)布:2024/11/5 22:30:2組卷:21引用:3難度:0.6
  • 2.在碳反應(yīng)中,RuBP羧化酶(R酶)可以催化CO2的固定,R酶由大亞基蛋白(L)和小亞基蛋白(S)組成。高等植物細(xì)胞中L由葉綠體基因編碼并在葉綠體中合成,S由細(xì)胞核基因編碼并在細(xì)胞溶膠中的核糖體合成后進(jìn)入葉綠體,與L組裝成有功能的酶。研究發(fā)現(xiàn),原核生物藍(lán)藻(藍(lán)細(xì)菌)R酶的活性高于高等植物。研究人員將藍(lán)藻S、L基因轉(zhuǎn)入某高等植物(甲)的葉綠體DNA中,同時(shí)去除甲的L基因。轉(zhuǎn)基因植株能夠存活生長(zhǎng)。檢測(cè)結(jié)果表明,轉(zhuǎn)基因植株中的R酶活性高于未轉(zhuǎn)基因的正常植株。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/7 8:0:2組卷:5引用:1難度:0.5
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    發(fā)布:2024/11/4 19:0:2組卷:1引用:1難度:0.7
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