某研究所以馬尾藻巖藻聚糖（SF）為研究對(duì)象，體外培養(yǎng)小鼠肉瘤細(xì)胞S180，做抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)的研究。下列為部分實(shí)驗(yàn)步驟與結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)步驟：
①將S180腫瘤細(xì)胞以RPMI1640為營養(yǎng)液，在5%CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
②將上述培養(yǎng)過的S180腫瘤細(xì)胞經(jīng)酶消化，按1×10³～1×10⁵個(gè)?mL^-1接種到96孔培養(yǎng)板，適宜條件下培養(yǎng)24h、48h、72h、96h后，以MTT法（又稱比色法，一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長的方法）于波長490nm處測(cè)定OD值，結(jié)果如圖1。

③在適宜的培養(yǎng)條件和恰當(dāng)?shù)腟180腫瘤細(xì)胞接種濃度下，研究不同濃度（0 mg?mL^-1、0.1 mg?mL^-1、0.5 mg?mL^-1、1 mg?mL^-1、2 mg?mL^-1、4 mg?mL^-1、8 mg?mL^-1、10 mg?mL^-1、15 mg?mL^-1、20 mg?mL^-1、25 mg?mL^-1、30 mg?mL^-1）的SF對(duì)S180腫瘤細(xì)胞增殖的抑制情況，96h后以MTT法于波長490nm處測(cè)定OD值，結(jié)果如圖2。
請(qǐng)回答下列問題：
（1）步驟①中以RPMI1640為培養(yǎng)液培養(yǎng)S180腫瘤細(xì)胞的原理是

細(xì)胞增殖

細(xì)胞增殖

。培養(yǎng)液中除細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)之外，通常還添加一定量的

抗生素

抗生素

，以防培養(yǎng)過程中的污染。
（2）步驟②中“消化”所使用的酶是

胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）

胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）

，為減少OD值測(cè)定的誤差，應(yīng)注意

多測(cè)量，取平均值

多測(cè)量，取平均值

。
（3）已知在一定細(xì)胞數(shù)目范圍內(nèi)，MTT法測(cè)得的OD值與活細(xì)胞數(shù)量呈正相關(guān)，由圖1可知步驟③中恰當(dāng)?shù)腟180腫瘤細(xì)胞接種濃度為

5×10³

5×10³

個(gè)?mL^-1。
（4）圖2實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在一定范圍內(nèi)SF濃度與細(xì)胞增殖的抑制作用呈

正相關(guān)

正相關(guān)

（填“正相關(guān)”或“負(fù)相關(guān)”），當(dāng)SF濃度達(dá)到

25

25

mg?mL^-1時(shí)細(xì)胞增殖的抑制作用達(dá)到極限，繼續(xù)增加SF濃度對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用變化不明顯。