人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價(jià)值,在臨床上需求量很大??茖W(xué)家利用現(xiàn)代生物技術(shù)獲得HSA以解決HSA的短缺問(wèn)題。如圖是以基因工程技術(shù)獲取重組HSA(rHSA)的兩條途徑?;卮鹣铝袉?wèn)題:
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(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增HSA基因時(shí),除了以從生物材料中提取的DNA作為模板及加入引物外,還需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物質(zhì)有 4種脫氧核苷酸、Taq酶4種脫氧核苷酸、Taq酶。
(2)途徑I中,將HSA基因?qū)氲剿臼荏w細(xì)胞所采用的方法是 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。在構(gòu)建水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)rHSA的載體時(shí):①需要將目的基因插入到 Ti質(zhì)粒的T-DNATi質(zhì)粒的T-DNA中,以便使HSA基因整合到水稻受體細(xì)胞染色體的DNA上;②需要加入水稻胚乳細(xì)胞啟動(dòng)子,目的是 確保HSIA基因只在水稻胚乳細(xì)胞中表達(dá)確保HSIA基因只在水稻胚乳細(xì)胞中表達(dá)。
(3)途徑Ⅱ中,不能直接用未經(jīng)Ca2+處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞,原因是 未經(jīng)Ca2+處理的大腸桿菌吸收周圍環(huán)境中DNA分子的能力極弱未經(jīng)Ca2+處理的大腸桿菌吸收周圍環(huán)境中DNA分子的能力極弱。
(4)為檢測(cè)HSA基因的表達(dá)情況,可提取受體細(xì)胞的 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì),用抗血清白蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】4種脫氧核苷酸、Taq酶;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;Ti質(zhì)粒的T-DNA;確保HSIA基因只在水稻胚乳細(xì)胞中表達(dá);未經(jīng)Ca2+處理的大腸桿菌吸收周圍環(huán)境中DNA分子的能力極弱;蛋白質(zhì)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:9引用:1難度:0.7
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