基因工程乙肝疫苗是乙肝表面抗原（HBsAg）亞單位疫苗，制作過程是采用現(xiàn)代生物技術(shù)將乙肝病毒表達(dá)表面抗原的基因進(jìn)行質(zhì)粒構(gòu)建，將其導(dǎo)入CHO細(xì)胞（中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞）中，通過培養(yǎng)這種CHO細(xì)胞來表達(dá)乙肝表面抗原亞單位，從而獲得疫苗，基本流程如圖1所示。請(qǐng)回答下列問題。
（1）要獲取HBsAg基因，除圖中方法外，還可以根據(jù)表面抗原蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測(cè)氨基酸序列氨基酸序列，進(jìn)而推測(cè)目的基因的脫氧核苷酸序列，再進(jìn)行人工合成。
（2）圖中①過程選用的限制酶是HindⅢ和XhoⅠHindⅢ和XhoⅠ，理由是HBsAg基因含有限制酶HindⅢ、SamⅠ和XhoⅠ的切割位點(diǎn)，但限制酶SamⅠ的切割位點(diǎn)位于目的基因上，若選用限制酶SmaⅠ則會(huì)破壞目的基因HBsAg基因含有限制酶HindⅢ、SamⅠ和XhoⅠ的切割位點(diǎn)，但限制酶SamⅠ的切割位點(diǎn)位于目的基因上，若選用限制酶SmaⅠ則會(huì)破壞目的基因。
（3）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增HBsAg基因片段的前提條件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物。圖2是某同學(xué)設(shè)計(jì)的一組引物（只標(biāo)注了部分堿基序列）：
該組引物是否合理否否，理由是引物Ⅱ自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對(duì)，這影響了與模板的堿基互補(bǔ)配對(duì)引物Ⅱ自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對(duì)，這影響了與模板的堿基互補(bǔ)配對(duì)。
（4）若一個(gè)HBsAg基因通過PCR擴(kuò)增了4次，在子代基因中同時(shí)含有兩個(gè)引物的基因占7878。
（5）HBsAg基因在CHO細(xì)胞中表達(dá)需要有特異性的啟動(dòng)子啟動(dòng)子，控制基因表達(dá)的起始時(shí)間和表達(dá)程度。HBsAg基因能否在CHO細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是CHO細(xì)胞的DNA上是否插入了HBsAg基因CHO細(xì)胞的DNA上是否插入了HBsAg基因。
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【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】氨基酸序列；HindⅢ和XhoⅠ；HBsAg基因含有限制酶HindⅢ、SamⅠ和XhoⅠ的切割位點(diǎn)，但限制酶SamⅠ的切割位點(diǎn)位于目的基因上，若選用限制酶SmaⅠ則會(huì)破壞目的基因；要有一段已知目的基因的核苷酸序列；否；引物Ⅱ自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對(duì)，這影響了與模板的堿基互補(bǔ)配對(duì)；；啟動(dòng)子；CHO細(xì)胞的DNA上是否插入了HBsAg基因
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【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：22引用：1難度：0.6
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號(hào)）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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