抗增殖蛋白（pHb2）直接參與調(diào)控細(xì)胞增殖、凋亡和分化等多種細(xì)胞生物學(xué)進(jìn)程，與腫瘤等疾病密切相關(guān)。為了解某動物pHb2抑制人宮頸癌細(xì)胞增殖的原因，科研工作者獲得了pHb2基因，并將其導(dǎo)入大腸桿菌，表達(dá)后獲得了pHb2?；卮鹣铝袉栴}：
（1）常用PCR技術(shù)擴(kuò)增pHb2基因，該技術(shù)依據(jù)的原理是

DNA復(fù)制

DNA復(fù)制

。
（2）如圖為所用載體示意圖，其中的限制酶的識別序列及切割位點如表所示。質(zhì)粒DNA含有啟動子和終止子，終止子的化學(xué)本質(zhì)是

DNA

DNA

。據(jù)圖分析，需要選用表中的限制酶

EcoRⅠ和PvitⅡ

EcoRⅠ和PvitⅡ

切割含pHb2基因的DNA片段。經(jīng)過這兩種酶切割的pHb2基因和載體進(jìn)行連接時，最好選用

T4DNA

T4DNA

（填“E.coli DNA”或“T4 DNA”）連接酶。

名稱	識別序列及切割位點	名稱	識別序列及切割位點
HindⅢ	A↓AGCTT	EcoRⅠ	G↓AATTC
PvitⅡ	CAG↓CTG	PstⅠ	CTGC↓AG
KpnⅠ	G↓GTACC	BamHⅠ	G↓GATCC

（3）為確定受體大腸桿菌細(xì)胞是否表達(dá)出了pHb2，可用

抗原—抗體雜交

抗原—抗體雜交

技術(shù)進(jìn)行檢測。