農(nóng)業(yè)上常用一定濃度的除草劑除去單子葉農(nóng)作物中的雙子葉雜草。農(nóng)業(yè)科研人員將抗除草劑基因轉(zhuǎn)入大豆,培育出抗除草劑大豆,培育過(guò)程中使用的質(zhì)粒如圖1所示,使用的含抗除草劑基因的DNA片段如圖2所示,使用含抗除草劑基因的農(nóng)桿菌對(duì)大豆細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化,并將該細(xì)胞培養(yǎng)成抗除草劑大豆幼苗的過(guò)程如圖3所示。已知限制性?xún)?nèi)切核酸酶BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)質(zhì)粒是獨(dú)立于
真核細(xì)胞細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA
真核細(xì)胞細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA
之外,具有自我復(fù)制能力的環(huán)狀雙鏈DNA分子。構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),可以用限制酶 BamHⅠ(或Sau3AⅠ)
BamHⅠ(或Sau3AⅠ)
(只寫(xiě)一種限制酶)切割質(zhì)粒,用限制酶 Sau3AⅠ
Sau3AⅠ
(只寫(xiě)一種限制酶)切割含目的基因的DNA片段,這樣切割的缺陷是 會(huì)出現(xiàn)質(zhì)粒和抗除草劑基因的自身環(huán)化和反向連接
會(huì)出現(xiàn)質(zhì)粒和抗除草劑基因的自身環(huán)化和反向連接
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(2)將上述切開(kāi)的質(zhì)粒與抗除草劑基因混合,加入DNA連接酶連接后,導(dǎo)入大豆受體細(xì)胞(不考慮基因突變)。若將大豆受體細(xì)胞分別在含青霉素、四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),這些大豆受體細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)都能生長(zhǎng),在含青霉素的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng),在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)
在含青霉素的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng),在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)
,都不能生長(zhǎng)
都不能生長(zhǎng)
三種情況。
(3)從個(gè)體生物學(xué)水平上,鑒定圖3中轉(zhuǎn)抗除草劑基因大豆幼苗是否抗除草劑的方法是 用一定濃度的除草劑噴灑在轉(zhuǎn)抗除草劑基因大豆幼苗上,觀(guān)察其生長(zhǎng)狀態(tài)
用一定濃度的除草劑噴灑在轉(zhuǎn)抗除草劑基因大豆幼苗上,觀(guān)察其生長(zhǎng)狀態(tài)
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