某科研單位欲研究神經(jīng)調(diào)節(jié)因素對大鼠腦缺血損傷后的神經(jīng)保護作用，選用大腦動脈閉塞大鼠模型為實驗材料，分別在不同缺血時間下對皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞凋亡指數(shù)進行測量，實驗組注射適量使用0.1mol?L^-1的PBS緩沖液溶解的人神經(jīng)調(diào)節(jié)素溶液，結(jié)果如圖所示。回答下列問題：

（1）由題意可知，實驗的自變量為

缺血時間和是否使用神經(jīng)調(diào)節(jié)素

缺血時間和是否使用神經(jīng)調(diào)節(jié)素

。
（2）該科研單位欲在缺血時間為1.5h的條件下，以0.5%為實驗濃度梯度，研究濃度為1%～3%的神經(jīng)調(diào)節(jié)素的實驗效果。補充完整下列實驗步驟：
①取若干同型號細(xì)胞培養(yǎng)瓶，均分為

6

6

組，并編號。
②在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中加入等量的大腦動脈閉塞大鼠的神經(jīng)中樞皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞，然后依次在實驗組細(xì)胞培養(yǎng)瓶中分別加入

濃度依次為1%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%的等體積的使用0.1mol?L的PES緩沖液溶解的人神經(jīng)調(diào)節(jié)素溶液

濃度依次為1%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%的等體積的使用0.1mol?L的PES緩沖液溶解的人神經(jīng)調(diào)節(jié)素溶液

，對照組試管中加入

等體積的0.1mol?L^-1的PBS緩沖液

等體積的0.1mol?L^-1的PBS緩沖液

。
③培養(yǎng)一段時間后，檢測并計算各組試管中

皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞的凋亡指數(shù)

皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞的凋亡指數(shù)

，并取平均值，結(jié)果如表：

濃度	1%	1.5%	2.0%	25%	3.0%
皮質(zhì)量區(qū)細(xì)胞凋亡指數(shù)	5.78	4.80	5.71	5.31	6.52

（3）為進一步探究1.5%的人神經(jīng)調(diào)節(jié)素是否為最適濃度，請寫出實驗思路：

在1%～2%濃度范圍內(nèi)設(shè)置更小濃度梯度的多個實驗組，在缺血時間為1.5h的條件下，記錄結(jié)果并分析大腦動脈閉塞大鼠的皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞凋亡指數(shù)

在1%～2%濃度范圍內(nèi)設(shè)置更小濃度梯度的多個實驗組，在缺血時間為1.5h的條件下，記錄結(jié)果并分析大腦動脈閉塞大鼠的皮質(zhì)區(qū)細(xì)胞凋亡指數(shù)

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